BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Các nhiệm vụ khác
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  21,779,882
  • Kết quả thực hiện nhiệm vụ

ĐTĐL.CN-08/15

2017-66-1278

Nghiên cứu chế tạo bộ kit chẩn đoán vi rút Ebola bằng kỹ thuật Realtime - RT - PCR

Học viện Quân y

Bộ Quốc phòng

Quốc gia

TS. Hoàng Xuân Sử

PGS.TS. Nguyễn Thái Sơn(1), ThS. Đinh Thị Thu Hằng, ThS. Nguyễn Văn An, BS. Nguyễn Hùng Cường, TS. Bùi Tiến Sỹ, TS. Hồ Hữu Thọ, PGS.TS. Lê Thu Hồng, PGS.TS. Vũ Xuân Nghĩa, ThS. Nguyễn Đình Ứng

Kỹ thuận chẩn đoán bệnh

01/07/2015

31/10/2017

2017

Hà Nội

155 tr.

Thiết lập thành công qui trình chế tạo bộ kit chẩn đoán virus Ebola bằng kỹ thuật realtime RT-PCR. Thiết lập được qui trình chế tạo bộ kit chẩn đoán virus Ebola bằng kỹ thuật realtime RT-PCR đạt ngưỡng phát hiện với các chủng BEBOV, SEBOV, TEBOV, và REBOV lần lượt là 7,8 copy/phản ứng, 42,7 copy/phản ứng, 54,5 copy/phản ứng và 77,8 copy/phản ứng, tương đương 668 copy/ml, 3660 copy/ml, 4671 copy/ml và 6668 copy/ml, độ đặc hiệu của kỹ thuật là 100%. Thiết lập được qui trình kỹ thuật RT-PCR tối ưu chẩn đoán cả 5 loài EBOV, trong đó có chủng Zaire gây dịch hiện tại. Nghiên cứu tổng hợp được RNA in vitro từ plasmid mang đoạn gen NP và một phần đoạn 3’UTR của cả 5 chủng EBOV sử dụng làm mẫu chứng dương cũng như tạo panel độ nhạy xác định ngưỡng phát hiện của kỹ thuậtRT -PCR truyền thống và kỹ thuật realtime RT-PCR chẩn đoán EBOV. RNA tổng hợp bằng phiên mã in vitro có sản lượng cao (10 10 - 1012 copy/µl), tinh khiết, và ổn định. Chế tạo thành công bộ kít chẩn đoán virus Ebola bằng kỹ thuật Realtime - RT - PCR. Chế tạo được bộ kit realtime RT-PCR chẩn đoán EBOV bao gồm đầy đủ các thành phần đã được tối ưu, độ nhậy 22,1 FFU/ml với ZEBOV; 42,1 FFU/ml với SEBOV; 7,8 FFU/ml với BEBOV; 34,8 FFU/ml với TEBOV, và 10,4FFU/ml với REBOV, và độ đặc hiệu là 100%, độ chính xác cao, độ ổn định là 3 tháng, bảo quản -20oC, 25 bộ, 24test/bộ. Chế tạo được bộ kit RT-PCR chẩn đoán cả 5 loài EBOV, bao gồm cả chủng Zaire gây dịch hiện tại, với độ nhạy và độ đặc hiệu 100%, ngưỡng phát hiện 1000 copy/phản ứng, độ ổn định của bộ kit là 3 tháng, bảo quản -20oC, 10 bộ, 50 test/bộ. Xây dựng thành công tiêu chuẩn cơ sở bộ kit realtime RT-PCR chẩn đoán virus Ebola. Xây dựng được tiêu chuẩn cơ sở cho bộ kit realtime RT-PCR-EBOV chẩn đoán EBOV gồm 6 chỉ tiêu về yêu cầu về kỹ thuật và phương pháp thử tương ứng kèm hướng dẫn sử dụng kit. Xây dựng được tiêu chuẩn cơ sở cho bộ kit RT -PCR chẩn đoán 5 loài EBOV bao gồm cả chủng Zaire gây dịch hiện tại, gồm 7 chỉ tiêu về yêu cầu về kỹ thuật và phương pháp thử tương ứng kèm hướng dẫn sử dụng kit.

Bộ kít chẩn đoán, Virus Ebola

24 Lý Thường Kiệt, Hà Nội

14468