Tạo dòng, biểu hiện và tinh sạch tiểu phần thụ thể tái tổ hợp SCARB2 của enterovirus A71 dung hợp foldon peptide

Chỉ số đề mục

Lĩnh vực nghiên cứu

Kỹ thuận chẩn đoán bệnh

Dạng tài liệu

Tác giả

Từ Quảng Long, Võ Nguyễn Hải Vy, Nguyễn Thanh Tấn⁽¹⁾, Trần Văn Hiếu⁽²⁾

Nhan đề

Tạo dòng, biểu hiện và tinh sạch tiểu phần thụ thể tái tổ hợp SCARB2 của enterovirus A71 dung hợp foldon peptide

Nhan đề tiếng anh

Cloning, expression, and purification of recombinant SCARB2 subunit receptor of enterovirus A71 fused with foldon peptide

Nguồn trích

Khoa học (Đại học Cần Thơ)

Năm xuất bản

2022

Số

CĐKHTN

Trang

1-7

ISSN

1859-2333

Từ khóa

Bẫy virus, Enterovirus A71, Foldon peptide, SCARB2

Từ khóa tiếng anh

Enterovirus A71, Foldon peptide, SCARB2, Virus trap

Tóm tắt

Enterovirus A71 (EV-A71) là tác nhân chính gây nên biến chứng nguy hiểm của bệnh Tay Chân Miệng, có thể dẫn đến thương tật, và tử vong ở trẻ nhỏ. Hiện nay, vaccine và hợp chất điều trị EV-A71 còn nhiều hạn chế, chưa được áp dụng rộng rãi. Vì thế, nhiều nghiên cứu tìm giải pháp thay thế hoặc bổ trợ đang được tiến hành, trong đó có bẫy virus. Với chức năng chính là bắt, cố định virus, ngăn sự xâm nhiễm, thể bám của bẫy cấu trúc từ thụ thể liên kết EV-A71, cụ thể là SCARB2. Trong nghiên cứu này, tiểu phần thụ thể tái tổ hợp SCARB2 dung hợp foldon peptide được dòng hóa, biểu hiện, và tinh sạch nhằm tạo thể bám ở dạng trimer hóa có ái lực cao với virus. Vector pET22b-scrb2-IIIx3 được cấu trúc trong E. coli DH5α, protein được biểu hiện trong E. coli BL21(DE3), và chỉ thu được cấu hình monomer, phần lớn ở dạng thể vùi. Việc tái gấp cuộn và tinh sạch protein được tiến hành nhằm đưa protein trở về dạng tan có hoạt tính sinh học. Những kết quả trên cung cấp thêm nhiều thông tin cần thiết, tạo tiền đề cho việc cấu trúc bẫy virus sau này.

Tóm tắt tiếng anh

Enterovirus A71 (EV-A71) is one of the most popular causative agents of Hand, Foot, and Mouth Disease (HFMD), also the main factor causing several severe symptoms, which can lead to children’s death. Up to now, vaccines and antiviral compounds still have disadvantages and are not widely used. Therefore, finding other alternatives and supplemental solutions is necessary, and virus-trap turns out to be a valuable candidate. The main function of the trap is to capture viruses, thereby preventing the infection. To do this, the trap needs to be constructed by one of the EVA71‘s binding receptors on human cells, and SCARB2 is the potential one. In this study, we cloned, expressed, and purified the recombinant SCARB2, which was fused with foldon peptide to structure the trimeric form with a highly viral-catching ability for virus trap. For the mentioned purposes, vector pET22b-scrb2-IIIx3 was constructed, and transformed into E. coli DH5α. Protein SCRB2-IIIx3 was expressed in E. coli BL21(DE3), but in monomeric form, and mostly in innclusion bodies. After that, it was refolded and purified to soluble form which has biological activity. Those results supportably provide insightful information, which creates a premise for further research.

Kí hiệu kho

TTKHCNQG, CVv 403

File toàn văn

Xem toàn văn