BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  22,334,443
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Kỹ thuận chẩn đoán bệnh

Đỗ Bá Quốc Thái, Lê Thanh Nguyên, Trần Văn Hiếu(1)

Tạo peptide đầu C bám định hướng polystyrene và thử khả năng bám

Cloning C-terminal polystyrene binding peptide fused protein A and its binding

Khoa học (Đại học Cần Thơ)

2022

CĐKHTN

105-110

1859-2333

Cố định kháng thể, Protein cầu nối, Protein PS-Ax1, Xét nghiệm miễn dịch sử dụng pha rắn

Adapter protein, Antibody immobilization, Protein PSAx1, Solid phase immunosorbent test

Hoạt hóa pha rắn thông qua việc cố định kháng thể lên trên bề mặt của chúng là bước đầu trong việc thiết kế và phát triển các kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch dựa trên pha rắn. Tuy nhiên, các kỹ thuật được sử dụng để cố định kháng thể như hấp thụ thụ động, cố định thông qua liên kết cộng hóa trị và liên kết ái lực chưa thực sự hiệu quả do còn tồn đọng nhiều nhược điểm như: sự gắn kết ngẫu nhiên trên của kháng thể, thời gian bảo quản, hiệu suất, cần can thiệp đến cấu trúc của kháng thể, đặc biệt là chi phí sản xuất cao. Vì vậy, trong nghiên cứu này, protein PS-Ax1 đóng vai trò như protein cầu nối giúp định hướng kháng thể trên bề mặt polystyrene và bước đầu xác nhận khả năng tương tác của protein mục tiêu với bề mặt vật liệu polystyrene. Kết quả này tạo tiền đề cho việc nghiên cứu phát triển các kit xét nghiệm miễn dịch khác.

Solid phase activation by the immobilization of antibodies onto material surface is the primary step in designing and developing solid phase immunosorbent tests. However, the present immobilization techniques: passive absorption, covalent coupling, and affinity immobilization are not completely efficient because of having many backlog problems which are randomly immobilization of antibodies, storage time, efficacy, interceding into the antibody structure, especially high production expense. Therefore, this study focused on designing protein PS-Ax1 which worked as an adapter protein helping to orientate antibodies onto polystyrene surface and the initial determination of binding capacity between PS-Ax1 and polystyrene. This study created a premise for studying and developing other solid phase immunosorbent kits.

TTKHCNQG, CVv 403

Xem toàn văn
  • [1] Verma, R., Boleti, E., & George, A.J. (1998), Antibody engineering: comparision of bacterial, yeast, insect and mammalian expression systems,J Immunol Methods, 216, 165-181. https://doi.org/10.1016/s0022-1759(98)00077-5
  • [2] Thao-Suong, T. N., Dang-Thuc, L. N., Khai-Hoan, N. P., Thuoc, T. L., & Hieu, T. V. (2021), Simultaneously targeting nitrocellulose and antibody by a dual-headed protein,Protein Expression and Purification, 177, 105764. https://doi.org/10.1016/j.pep.2020.105764
  • [3] Ortega-Vinuesa, J. L., Bastos-González, D., & Hidalgo-Álvarez, R. (1996), Effect of Storage Time on the Immunoreactivity of IgG Physically Adsorbed or Chemically Bound to Latex Beads,J. Colloid Interface Sci., 184(1), 331–334. https://doi.org/10.1006/jcis.1996.0627
  • [4] Norde, W., & Lyklema, J. (1978), The adsorption of human plasma albumin and bovine pancreas ribonuclease at negatively c-harged polystyrene surfaces: I. Adsorption isotherms. Effects of c-harge, ionic strength, and temperature,J. Colloid Interface Sci., 66(2), 257–265. https://doi.org/10.1016/00219797(78)90303-X
  • [5] Kumada, Y., Miyamura, Y., Tanibata, R., Takahashi, K., Ogasawara, S., Gondaira, F., & Horiuchi, J. I. (2021), Design and site-directed immobilization of single-chain Fv antibody to polystyrene latex beads via material-binding peptides and application to latex turbidimetric assay,Journal of bioscience and bioengineering, 131(1), 84–89. https://doi.org/10.1016/j.jbiosc.2020.08.014
  • [6] Kumada, Y., Kang, B., Yamakawa, K., Kishimoto, M., & Horiuchi, J. I. (2015), Efficient preparation and site-directed immobilization of VHH antibodies by genetic fusion of poly(methylmethacrylate)-binding peptide (PMMA-Tag),Biotechnol. Prog, 31(6), 1563– 1570. https://doi.org/10.1002/btpr.2169
  • [7] Kumada,Y., Ishikawa, Y., Fujiwara, Y., Takeda, R., Miyamoto, R., Daisuke, N., Momosa, S., Kang, B., & Kishimoto, M. (2014), Efficient refolding and immobilization of PMMA-tag-fused singlechain Fv antibodies for sensitive immunological detection on a PMMA plate,J. Immunol. Methods, 411, 1–10. https://doi.org/10.1016/j.jim.2014.05.015
  • [8] Kumada, Y., Shiritani, Y., Hamasaki, K., Nakagawa, A., Sasaki, E., & Kishimoto, M. (2010), Novel solid-phase refolding method for preparation of scFv-immobilized polystyrene plates with highantigen-binding activity,Anal. Bioanal. Chem., 398(3), 1295–1303. https://doi.org/10.1007/s00216-010-4035-7
  • [9] Kumada, Y. (2014), Site-specific immobilization of recombinant antibody fragments through materialbinding peptides for the sensitive detection of antigens in enzyme immunoassays,Biochim. Biophys. Acta, vol. 1844(11), 1960–1969. https://doi.org/10.1016/j.bbapap.2014.07.007
  • [10] Jódar-Reyes, A. B., Ortega-Vinuesa, J. L., & MartínRodríguez, A. (2005), Adsorption of different amphiphilic molecules onto polystyrene latices,J. Colloid Interface Sci., 282(2), 439–447. https://doi.org/10.1016/j.jcis.2004.08.183
  • [11] Tang, J. B., Sun, X. F., Yang, H. M., Zhang, B. G., Li, Z. J., Lin, Z. J., & Gao, Z. Q. (2013), Welloriented ZZ-PS-tag with high Fc-binding onto polystyrene surface for controlled immobilization of capture antibodies,Analytica Chimica acta, 776, 74–78. https://doi.org/10.1016/j.aca.2013.03.017
  • [12] Chivers, E. C., Apurba, L. K., Edward, D. L., & Mark, H. (2011), How the biotin-streptavidin interaction was made even stronger: investigation via crystallography and a chimaeric tetramer,The Biochemical journal, 435(1), 55- 63. https://doi.org/10.1042/BJ20101593
  • [13] Chan, L., Cross, H., She, J. K., Cavalli, G., Martins, H. F. P., & Neylon, C. (2007), Covalent Attachment of Proteins to Solid Supports and Surfaces via Sortase-Mediated Ligation,PLOS ONE, 2(11), e1164. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0001164
  • [14] Weber, J., Peng, H., & Rader, C. (2017), F-rom rabbit antibody repertoires to rabbit monoclonal antibodies,Experimental & molecular medicine, 49(3), e305. https://doi.org/10.1038/emm.2017.23