Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  23,966,092
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Giải phẫu học và sinh lý học thú y

Tran Hong Diem, Phung Thi Thu Huong, Trần Hồng Diễm(1)

Phát hiện microRNA của sán lá gan bằng phương pháp khuếch đại đẳng nhiệt trung gian vòng lặp (LAMP)

Detecting Fasciola hepatica and F. gigantica microRNAs using loop-mediated isothermal amplification (LAMP)

Tạp chí khoa học và công nghệ - Đại học Nguyễn Tất Thành

2019

5

6-11

2615-9015

Sán lá gan lớn là một bệnh phổ biến gây ra bởi hai lo i ký sinh trùng thuộc lớp Trematodo, chi Fasciola, là Fasciola hepatica và F. gigantica. Sự có mặt rộng rãi của hai loài này trong nước và thực phẩm làm cho bệnh sán lá gan lớn trở thành một trong nh ng bệnh truyền nhi m từ động vật sang người phổ biến nhất, ảnh hưởng đến 2,4 triệu người thuộc hơn 75 quốc gia trên thế giới. Th ng thường, Fasciola hepatica và F. gigantica có thể được phát hiện bằng các phương pháp mi n dịch (phát hiện kháng thể đặc hiệu của kí sinh trùng), kĩ thuật kí sinh trùng để phát hiện trứng sán, hay sử dụng kĩ thuật sinh học phân tử để phát hiện DNA đặc trưng của kí sinh. Trong thời gian gần đ y miRNA đã được nghiên cứu công nhận là dấu chứng chẩn đoán sinh học nhiều tiềm năng đối với các bệnh, trong đó có các bệnh gây ra bởi kí sinh trùng. Mặt khác, phương pháp khuếch đ i đẳng nhiệt trung gian vòng lặp – LAMP là một phương pháp khuếch đ i nhanh nh y ở một nhiệt độ cố định. Với giới h n phát hiện lớn, LAMP trở thành phương pháp phù hợp cho chuẩn đoán nhanh t i vùng nhi m. Kĩ thuật LAMP đã được chứng minh có khả năng phát hiện miRNA mục tiêu trong ph m vi từ 1amol đến 1pmol. Nghiên cứu này giới thiệu kĩ thuật LAMP được sửa đổi để phát hiện một lo i miRNA đặc trưng cho cả hai loài Fasciola hepatica và F. gigantica. Phương pháp này kh ng yêu cầu bước gia nhiệt ban đầu và có độ nh y gấp 1.000 lần so với các nghiên cứu trước đó. Kết quả này t o nên tiền đề quan trọng cho việc phát triển các thiết bị kĩ thuật mới, đơn giản, nhanh, t i chỗ cho chuẩn đoán bệnh sán lá gan cũng như các bệnh nhi m kí sinh trùng khác.

Fascioliasis is a parasitic infection typically caused by two common parasites of class Trematodo, genus Fasciola, named Fasciola hepatica and F. gigantica. The widespread appearance of these species in water and food makes fascioliasis become a global zoonotic disease that affects 2.4 million people in more than 75 countries worldwide. Typically, F. hepatica and F. gigantica can be recognized with parasitological techniques to detect Fasciola spp. eggs, immunological techniques to detect worm-specific antibodies, or molecular techniques for instance polymerase chain reactions to detect parasitic genomic DNA. Recently, miRNAs have been recognised a key regulator and potential diagnostic biomarkers of diseases, including parasitic infection. An isothermal PCR called LAMP (loop-mediated isothermal amplification) is rapid, sensitive, and this amplification is very extensive, making it well-suited for field diagnostics. LAMP reaction for miRNA detection has been introduced and is able to detect miRNA in the range between 1.0amol and 1.0pmol, showing high selectivity to differentiate one miRNA sequence from others. Here, we introduced a modified LAMP to detect a typical miRNA of both F. hepatica and F. gigantica. Our method does not demand an initial heating step and the reactions have a high sensitivity even 1,000 times higher in comparison to that reported in previous studies. These results create a promising technique basis for some novel and simple device to diagnose fascioliasis and other parasitic diseases at pointof- care.

TTKHCNQG, CVv 503