Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  20,808,332
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Dương Đức Hiếu, Bùi Khánh Linh, Sử Thanh Long, Nguyễn Văn Thọ, Trịnh Đình Thâu(1)

Phân tích và xác định thành phần protein của sán lá gan lớn bằng phương pháp Western Blot

Analysis and determination of protein components of Fasciola gigantica by Western Blot method

Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y

2017

1

Căn cứ vào đặc điểm hình thái học và các chỉ số kích thước của loài sán lá gan lớn Fasciola spp., 2 loài sán lá gan lớn ký sinh ở trâu bò, lưu hành trên địa bàn tỉnh Bắc Giang đã được xác định là Fasciola gigantica và Fasciola sp. dạng trung gian. Trong nghiên cứu này, các mẫu kháng nguyên chất tiết và kháng nguyên thân loài Fasciola gigantica được tách chiết, phân tích và so sánh các thành phần protein, nhằm xác định những protein có tính kháng nguyên cao, phục vụ cho việc chẩn đoán bệnh sán lá gan lớn. Kết quả điện di SDS-PAGE trên thạch 15% polyacrylamide nhuộm Coomassive blue và silver đã xác định được 26 dải protein kháng nguyên thân của F.gigantica với khối lượng phân tử dao động từ 10 kDa đến 130 kDa và 15 dải protein kháng nguyên chất tiết có khối lượng phân tử dao động từ 10 kDa đến 70 kDa. Bằng phương pháp thẩm tách miễn dịch trên màng lai PVDF (Western Blot) đã phát hiện các dải protein kháng nguyên thân có phản ứng với kháng thể trong huyết thanh bò nhiễm sán lá gan, có khối lượng phân tử lần lượt là 24, 27, 36, 38, 45, 55, 70 và 102 kDa và các dải protein kháng nguyên chất tiết có phản ứng với kháng thể trong huyết thanh bò nhiễm sán lá gan có khối lượng phân tử lần lượt là 21, 24, 27, 38 và 70 kDa.

Based on morphological characteristics and body size indexes of Fasciola spp., two bovine liver fluke species circulating in cattle and buffalo in Bac Giang province, Viet Nam were identified, such as Fasciola gigantica and hybrid form of Fasciola sp. In order to detect the protein components with high antigeniCity for serodiagnosis of fasciolosis in cattle and buffalo, the excretory-secretory and somatic antigens of Fasciola gigantica were extracted, analyzed and compared in this study. The result of SDS – PAGE electrophoresis on 15% polyacrymide gel, staining Coomassive blue and silver showed that 26 somatic antigen protein bands of Fasciola gigantica having molecular weight from 10k Da to 130 kDA and 15 excretory-secretory antigen protein bands having molecular weight from 10 kDa to 70 kDa were identified. By applying the Wetern Blot method, the antigen-antibody reaction in Fasciola infected cattle serum was detected on PVDF membrane. The excretory-secretory antigen protein bands reacted with sero-antibody having molecular weight of 24, 27, 36; 38, 45, 55, 70, 102 kDa respectively and the somatic antigen protein bands reacted with sero-antibody having molecular weight of 21, 24, 27, 38, 70 kDa respectively.