BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  28,136,358
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

62

Công nghệ sinh học

BB

Ong Xuân Phong(1), Lý Khánh Linh, La Việt Hồng, Nguyễn Văn Phong, Phạm Bích Ngọc

Tạo cây xoan ta chuyển gen GS1 mã hóa glutamine synthetase tăng khả năng sử dụng nitrogen

Genrating glutamine synthetase encoded GS1 transgenic melia azedarach L. plants enhanced nitrogen

Tạp chí Khoa học và Công nghệ - Đại học Thái Nguyên

2023

01

24-30

1859-2171

Chuyển gen, Gen GS1, Glutamine synthetase, Nitrogen, Promoter, Xoan ta

GS1 gene, Melia azedarach, Nitrogen, Promoter, Transgenic

Glutamine synthetase được mã hóa bởi gen GS1 là enzyme đồng hóa nitrogen, dùng amoniac như một cơ chất xúc tác cho phản ứng chuyển hóa glutamic acid thành glutamine phụ thuộc vào ATP. Dựa trên cặp enzyme XmaI và SacI, chúng tôi đã thiết kế thành công cấu trúc mang gen GS1 (pBI121/GmPrP2:GS1_cmyc:NOS) và biến nạp vào vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens. Tiến hành thí nghiệm chuyển gen vào hơn 700 thể nhận gen là các đoạn thân mầm cây in vitro, đã thu được 33 chồi tái sinh và ra rễ sau 3 lần sàng lọc trên môi trường nuôi cấy chọn lọc có chứa 50 - 150 mg/l kanamycin. Kết quả kiểm tra các dòng xoan ta chuyển gen bằng kỹ thuật PCR đã cho kết quả 25/33 dòng xuất hiện băng vạch có kích thước ̴ 1,1 kb, tương đương với kích thước của gen GS1. Kết quả thu được trong nghiên cứu là cơ sở cho việc chọn tạo giống xoan ta chuyển gen có khả năng sinh trưởng nhanh.

Glutamine synthetase encoded by the GS1 gen is a nitrogen-assimilating enzyme that uses ammonia as a substrate for the ATP-dependent conversion of glutamic acid to glutamine. Based on the enzyme pair XmaI and SacI, we have successfully engineered pBI121/GmPrP2:GS1_cmyc:NOS and transformed it into Agrobacterium tumefaciens. Carrying out the gen transformation experiment on more than 700 gen recipients that are stem segments in vitro, 33 regenrated and rooted shoots were obtained after 3 screenings on se-lective culture medium containing 50 - 150 mg /l kanamycin. The results of checking transgenic lines by PCR technique showed that 25/33 lines appeared with a bar with a size of ̴ 1.1 kb, equivalent to the size of the GS1 gen. The obtained results are the basis for the se-lection and breeding of transgenic species with fast growth gens.

TTKHCNQG, CTv 178

Xem toàn văn
  • [1] V. T. Bui; X. D. Do; V. S. Le; H. H. Chu (2013), The high frequency of transformation procedure for expression of gus gene in chinaberry tree (Melia azedarach L.) using Agrobacterium,Journal of Biotechnology
  • [2] T. B. Le; V. C. Phan; V. H. Nong; N. H. Truong; Q. H. Le (2003), Application of molecular techniques in the study of biological resources in Vietnam,Science and Technology Publishing House
  • [3] L. Chen; B. Jiang; C. Wu; S. Sun; W. Hou; T. Han (2014), GmPRP2 promoter drives root-preferential expression in transgenic Arabidopsis and soybean hairy roots,BMC Plant Biology
  • [4] V. M. Nguyen; V. H. La; X. P. Ong (2013), Methods in plant physiology,Ha Noi National University Publishing House
  • [5] F. Gallardo; J. Fu; F. R. Cantón; A. García-Gutiérrez; F. M. Cánovas; E. G. Kirby (1999), Expression of a conifer glutamine synthetase gene in transgenic poplar,Planta
  • [6] F. R. Cantón; M.-F. Suárez; M. Jose-Estanyol; F. M. Cánovas (1999), Expression analysis of a cytosolic glutamine synthetase gene in cotyledons of Scots pine seedlings: developmental, light regulation and spatial distribution of specific transcripts,Plant Molecular Biology
  • [7] T. W. Becker; M. Caboche; E. Carrayol; B. Hirel (1992), Nucleotide sequence of a tobacco cDNA encoding plastidic glutamine synthetase and light inducibility, organ specificity and diurnal rhythmicity in the expression of the corresponding genes of tobacco and tomato,Plant Molecular Biology
  • [8] Z. Zhang; S. Xiong; Y. Wei; X. Meng; X. Wang; X. Ma (2017), The role of glutamine synthetase isozymes in enhancing nitrogen use efficiency of N-efficient winter wheat,Scientific Reports
  • [9] E. Nemeth; Z. Nagy; A. Pecsvaradi (2018), Chloroplast Glutamine Synthetase, the Key Regulator of Nitrogen Metabolism in Wheat, Performs Its Role by Fine Regulation of Enzyme Activity via Negative Cooperativity of Its Subunits,Frontiers in Plant Science
  • [10] Y. Wang; B. Fu; L. Pan; L. Chen; X. Fu; K. Li (2013), Overexpression of Arabidopsis Dof1, GS1 and GS2 enhanced nitrogen assimilation in transgenic tobacco grown under low-nitrogen conditions,Plant Molecular Biology Reporter
  • [11] L. K. Ly; T. P. Bui; P. T. Do; A. V. T. Le; P. Van Nguyen; N. B. Pham (2020), Demonstration of improved plant growth and biomass production by At1g73160 promoter-controlled root-preferential expression of the AtGA20ox gene,Research Square
  • [12] S. Huang; A. S. Raman; J. E. Ream; H. Fujiwara; R. E. Cerny; S. M. Brown (1998), Overexpression of 20-oxidase confers a gibberellin-overproduction phenotype in Arabidopsis,Plant Physiology
  • [13] X. D. Do; V. T. Bui; V. G. Ho; V. S. Le; H. H. Chu (2011), Transformation of Gibberellin 20-oxidase encoded gene to paradise tree (Melia azedarach L.) via Agrobacterium tumefaciens,Journal of Biotechnology