Phát triển dòng vi khuẩn biểu hiện độc tố đường ruột tái tổ hợp của vi khuẩn enterotoxigenic Escherichia coli gây tiêu chảy ở lợn con

Chỉ số đề mục

Lĩnh vực nghiên cứu

Vi sinh vật học thú y (trừ vi rút học thú y)

Dạng tài liệu

Tác giả

Võ Thành Thìn, Lê Đình Hải⁽¹⁾, Đặng Văn Tuấn⁽²⁾, Vũ Khắng Hùng

Nhan đề

Phát triển dòng vi khuẩn biểu hiện độc tố đường ruột tái tổ hợp của vi khuẩn enterotoxigenic Escherichia coli gây tiêu chảy ở lợn con

Nhan đề tiếng anh

Development of enterotoxin gene expression bacteria of enterotoxigenic Escherichia coli caused diarrheal disease in piglets

Nguồn trích

Khoa học Kỹ thuật Thú y

Năm xuất bản

2018

Số

5

Trang

43-48

ISSN

1859-4751

Từ khóa

ETEC, Biểu hiện, Độc tố, Tái tổ hợp

Từ khóa tiếng anh

ETEC, Expression, Toxin, Recombinant, Escherichia coli

Tóm tắt

Mục tiêu của nghiên cứu là tạo được chủng vi khuẩn có khả năng biểu hiện độc tố đường ruột tái tổ hợp. Trong nghiên cứu này, chuỗi gen mã hóa đồng thời ba loại độc tố đường ruột của vi khuẩn E. coli được khuếch đại và gắn vào vector pET 24a(+) và pET32a(+) và biến nạp thành công vào tế bào biểu hiện E. coli BL21. Kết quả kiểm tra tạo dòng bằng phương pháp PCR và giải trình tự cho thấy, các chủng vi khuẩn BL21 mang chuỗi gen tái tổ hợp có trình tự nucleotide phù hơp so với trình tự nucleotide của gen mã hóa các loại độc tố STa, STb và LT trên ngân hàng gen. Các chủng vi khuẩn mang chuỗi gen tái tổ hợp có thể biểu hiện protein mong muốn trong môi trường LB broth với chất cảm ứng là IPTG.

Tóm tắt tiếng anh

The objective of this study was to create recombinant enterotoxin gene expression cells. The genetic fusion of enterotoxin gene was amplified and attached into 24a(+) and pET32a(+) vector and then transfored to BL21 successfully. PCR amplification and nucleotide sequence were used for determination of genetic fusion of enterotoxin gene in BL21 strain. The recombinant proteins were evaluated by SDS-PAGE and the immunoreactivity was characterized by Western blotting. The studied results showed that nucleotide sequences of genetic fusion of enterotoxin genes were consistent with nucleotide sequences of STa, STb and LT on GeneBank. The desired recombinant protein was expressed in LB broth with 1mM IPTG substance as inducer.

Kí hiệu kho

TTKHCNQG, CVv 65

File toàn văn

Xem toàn văn

Tài liệu tham khảo

[1] Zhang, W. (2014), Progress and challenges in vaccine development against enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC)-associated porcine PostWeaning Diarrhoea (PWD),J Vet Med Res,1, 1006.
[2] Sørensen, H. P. and K. K. Mortensen, (2005), Advanced genetic strategies for recombinant protein expression in Escherichia coli,Journal of Biotechnology,115, 113-128.
[3] Nagy,B.andP.Z.Fekete (2005), Enterotoxigenic Escherichia coli in veterinary medicine,International journal of medical microbiology : IJMM,295, 443-454.
[4] Nagy, B., L. H. Arp, H. W. Moon and T. A. Casey (1992), Colonization of the Small Intestine of Weaned Pigs by Enterotoxigenic Escherichia coli thatLack KnownColonization Factors,Veterinary pathology,29, 239-246
[5] Melkebeek,V.,B.M.Goddeeris andE.Cox (2013), ETECvaccination in pigs,Veterinary immunology and immunopathology,152, 37-42
[6] Gyles, C. L. and Fairbrother, J. M. (2010), Escherichia coli, in Pathogenesis of Bacterial Infections in Animals, Fourth Edition (eds C. L. Gyles, J. F. Prescott, J. G. Songer and C. O. Thoen), Wiley-Blackwell, Oxford, UK,doi: 10.1002/9780470958209.ch15
[7] Dubreuil, J. D., R. E. Isaacson and D. M. Schifferli, (2016), Animal Enterotoxigenic Escherichia coli.,EcoSal Plus, 7 (1)
[8] Clark, T. and D. Cassidy-Hanley (2004), Recombinant subunit vaccines: potentials and constraints,Developments in biologicals,121, 153-163.
[9] Bornhorst, J. A. and J. J. Falke (2000), Purification of Proteins Using Polyhistidine Affinity Tags,Methods in enzymology,326, 245-254.
[10] Lê Đình Hải, Đặng Văn Tuấn, Vũ Khắc Hùng, Võ Thành Thìn (2017), Nghiên cứu tạo dòng vi khuẩn DH5 alpha mang chuỗi gen tái tổ hợp mã hóa độc tố đường ruột (STa, STb và LT) của vi khuẩn E. coli.,Kỷ yếu Hội nghị khoa học chăn nuôi - thú y toàn quốc 2017, trang 354
[11] Lê Đình Hải, Đặng Văn Tuấn, Vũ Khắc Hùng, Võ Thành Thìn (2017), Sự lưu hành và tương đồng gen mã hóa độc tố đường ruột (STa, STb và LT) của vi khuẩn enterotoxigenic E. coli phân lập từ lợn con bị tiêu chảy,Khoa học kỹ thuật thú y, XXIV(1), 38-52.