



- Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam
Công nghệ gen; nhân dòng vật nuôi;
Hoàng Thị Thao(1), Nguyễn Tuấn Điệp, Chu Đức Hà, Hoàng Thị Mai, Lê Văn Sơn, Chu Hoàng Mậu
Thiết lập và đánh giá hiệu quả của quy trình chuyển gen VRD1 trên giống đậu xanh ĐX22
Khoa học công nghệ nông nghiệp Việt Nam
2019
09
43 - 47
1859 - 1558
Trong nghiên cứu này, giống đậu xanh ĐX22 đã được ghi nhận chuyển thành công gen VrD1, mã hóa protein defensin liên quan đến cơ chế kháng một Callosobruchus chinensis. Trước hết, quy trình tái sinh giống ĐX22 in vitro đã được nghiên cứu và tối ưu để tạo tiền đề cho chuyển gen. Cụ thể, lá mầm được nuôi trong môi trường cảm ứng chối chứa BAP 3,5 mg/l. Sau 15 ngày cấy chuyển, các cụm chồi được kéo dài trên môi trường có bổ sung GA, 0,5mg/1 và IAA 0,1mg/l. Nghiên cứu đã chỉ ra môi trường dinh dưỡng chứa IAA 0,5mg/l thích hợp cho quá trình tạo rễ in vitro. Tiếp theo, giống ĐX22 được chuyển gen VRD1 thông qua đồng nuôi cấy với Agrobacterium mang vector pPhaso-dest-VRD1. Kết quả đã xác định được 5 dòng mang gen chuyển ở thế hệ T, bằng kỹ thuật PCR. Trong đó, dòng ĐX1-3 và ĐX1-7 ở thế hệ T, có biểu hiện của protein VrD1 với hàm lượng tương ứng là 6,24 và 9,26 µg/mg protein tổng số. Kết quả của nghiên cứu này đã tạo tiền để quan trọng cho công tác chọn tạo giống đậu xanh chuyển gen có khả năng kháng C. chinensis.
TTKHCNQG, CVv 490
- [1] War; A. R.; Murugesan; S.; Boddepalli; V. N.; Srinivasan; R.; Nair; R. M. (2017), Mechanism of resistance in mungbean [Vigna radiata (L.) R. Wilczek var. radiata] to bruchids, Callosobruchus spp. (Coleoptera: Bruchidae).,Front Plant Sci, 8: 1031.
- [2] Shiau; Y. S.; Horng; S. B.; Chen; C. S.; Huang; P. T.; Lin; C.; Hsueh; Y. C.; Lou; K. L. (2006), Structural analysis of the unique insecticidal activity of novel mungbean defensin VrD1 reveals possibility of homoplasy evolution between plant defensins and scorpion neurotoxins.,J Mol Recognit, 19(5): 441-450.
- [3] Semagn; K. (2014), Leaf tissue sampling and DNA extraction protocols.,In Molecular Plant Taxonomy: Methods and Protocols, 53-67.
- [4] Rahman; M.; Iqbal; M. A.; Shaheen; N.; Zafar; Y. (2013), Microsatellites: Methods & Protocols.,In Stress and Plant Biotechnology, 130-152.
- [5] Jaiwal; P. K.; Kumari; R.; Ignacimuthu; S.; Potrykus; I.; Sautter; C. (2001), Agrobacterium tumefaciens- mediated genetic transformation of mungbean (Vigna radiata L. Wilczek) - a recalcitrant grain legume.,Plant Sci, 161(2): 239-247.
- [6] Chen; J. J.; Chen; G. H.; Hsu; H. C.; Li; S. S.; Chen; C. S. (2004), Cloning and functional expression of a mungbean defensin VrD1 in Pichia pastoris.,J Agric Food Chem, 52(8): 2256-2261.
- [7] Nguyễn Thị Luyện; Nguyễn Vũ Thanh Thanh; Lò Mai Thu; Chu Hoàng Mậu (2009), Hoàn thiện hệ thống tái sinh in vitro ở cây đậu xanh (Vigna radiata (L.) Wilczek) phục vụ cho chuyển gen.,Tạp chí Khoa học và Công nghệ , 54(6): 123-128.