Biểu hiện thụ thể kháng nguyên dạng khảm đặc hiệu CD20 (CD20-CAR) trên bề mặt tế bào Jurkat T và đánh giá hoạt tính sinh học của nó

Chỉ số đề mục

Lĩnh vực nghiên cứu

Ung thư học và phát sinh ung thư

Dạng tài liệu

Tác giả

Võ Nguyễn Thanh Thảo, Chu Đào Xuân Trúc, Huỳnh Đàm Kim Tuyền, Phùng Thị Việt Anh, Nguyễn Đăng Quân, ThS Võ Nguyễn Thanh Thảo⁽¹⁾

Nhan đề

Biểu hiện thụ thể kháng nguyên dạng khảm đặc hiệu CD20 (CD20-CAR) trên bề mặt tế bào Jurkat T và đánh giá hoạt tính sinh học của nó

Nhan đề tiếng anh

Expression of CD20-specific chimeric antigen receptor (CD20-CAR) on Jurkat T cells and evaluation its biological activity

Nguồn trích

Khoa học & công nghệ Việt Nam

Năm xuất bản

2022

Số

5B

Trang

6 - 10

ISSN

1859-4794

Từ khóa

CD20, Liệu pháp miễn dịch, Thụ thể kháng nguyên, Dạng khảm

Từ khóa tiếng anh

CD20, Chimeric antigen receptor, Immunotherapy

Tóm tắt

CD20 hiện đang là kháng nguyên mục tiêu được chú ý trong các hướng nghiên cứu điều trị ung thư máu liên quan tế bào B bằng liệu pháp miễn dịch. Nhiều kháng thể đơn dòng kháng CD20 như Rituximab, Ibritumomab, Tositumomab... đã được phát triển và ứng dụng trong điều trị. Những năm gần đây, liệu pháp miễn dịch sử dụng tế bào T biểu hiện thụ thể kháng nguyên dạng khảm (Chimeric antigen receptor - CAR) cho thấy nhiều tiềm năng trong điều trị và hiện đang được quan tâm nghiên cứu. Trong nghiên cứu này, các tác giả tạo dòng và biểu hiện 2 phiên bản CAR đặc hiệu CD20 (CD20- CAR), bao gồm phiên bản tham khảo trình tự từ patent (SEQ01) và phiên bản nghiên cứu do nhóm tự thiết kế (SEQ02) trên bề mặt tế bào Jurkat T. Sau khi được chuyển nạp 24 giờ, các vector mang gen mã hoá CD20-CAR, tế bào Jurkat T có thể biểu hiện CD20-CAR SEQ01 và SEQ02 ở mức độ mRNA và protein. Kết quả phân tích tế bào theo dòng chảy (FACS) cho thấy, CD20-CAR được biểu hiện trên bề mặt tế bào Jurkat T. Trong điều kiện đồng nuôi cấy với tế bào ung thư Raji B biểu hiện kháng nguyên CD20, tế bào Jurkat T biểu hiện CAR SEQ01 và SEQ02 được kích hoạt tăng tiết Interleukin 2 (IL-2). Kết quả cho thấy, nghiên cứu đã biểu hiện thành công đặc hiệu CD20-CAR trên tế bào Jurkat T và bước đầu ghi nhận có hoạt tính sinh học. Đây là cơ sở cho nghiên cứu tiếp theo tạo tế bào lympho T CD4⁺ và CD8⁺ biểu hiện CD20-CAR.

Tóm tắt tiếng anh

CD20 is a potential target for immunotherapy treatments of haematological malignancies due to its specific expression and unique biological property. Over the years, many anti-CD20 monoclonal antibodies (mAbs) have been developed, such as Rituximab, Ibritumomab, Tositumomab, etc., and applied in B cells related to cancer treatments. Recently, a new immunological therapy, namely Chimeric antigen receptor (CAR) T-cell therapy, in which the patient’s T cells are reprogrammed ex vivo with a transgene encoding a CAR in order to active them against the tumour, has emerged as a promising treatment for B-cell malignancies. In this study, the authors generated and expressed two variants of chimeric receptor antigen-specific to CD20 on Jurkat T cells, in which one variant referenced the sequence f-rom the patent (SEQ01) and the other was our own designed sequence (SEQ02). The transient expression after electroporation 24 hours confirmed the presence of mRNA and protein of CD20-CAR in both sequences. Moreover, these chimeric receptors were also detected on the membrane of Jurkat cells using flow cytometer analysis, indicating that the author could successfully transduce and express CD20-CAR in Jurkat cells. Co-culture CD20-Jurkat-CAR-T cells with CD20-expressing Raji B cells show that the generated Jurkat could be activated via their chimeric receptors through increasing the secretion of Interleukin-2 in both sequences. Taken together, our preliminary data suggest that the authors have been able to express the CD20-activating functional transgenic receptor on Jurkat cells, which will be applied for generating CD20-CAR-expressing CD4⁺/CD8⁺ T cells.

Kí hiệu kho

TTKHCNQG, CVv 8

File toàn văn

Xem toàn văn

Tài liệu tham khảo

[1] M. Hudecek (2013), Receptor affinity and extracellular domain modifications affect tumor recognition by ROR1-specific chimeric antigen receptor T-cells.,Clin. Cancer Res., 19(12), pp.3153-3164.
[2] C. Imai (2004), Chimeric receptors with 4-1BB signaling capacity provoke potent cytotoxicity against acute lymphoblastic leukemia.,Leukemia, 18, pp.676-684.
[3] H.M. Finney; A.N. Akbar; A.D.G. Lawson (2004), Activation of resting human primary T cells with chimeric receptors: co-stimulation f-rom CD28, inducible costimulator, CD134, and CD137 in series with signals f-rom the TCRζ chain.,J. Immunol., 172, pp.104-113.
[4] B.G. Till (2012), CD20-specific adoptive immunotherapy for lymphoma using a chimeric antigen receptor with both CD28 and 4-1BB domains: pilot clinical trial resuls.,Blood, 119(17), pp.3940-3950.
[5] Võ Nguyễn Thanh Thảo; Lê Thị Thu Lệ; Chu Đào Xuân Trúc; Nguyễn Thị Phương Thảo; Nguyễn Đăng Quân (2018), Tạo và đánh giá hoạt tính gây chết tế bào ung thư máu của kháng thể đơn dòng kháng CD20.,Hội nghị khoa học công nghệ sinh học toàn quốc, tr.689-695.
[6] A. Martyniszyn (2017), CD20-CD19 bispecific CAR T cells for the treatment of B-cell malignancies.,Hum. Gene Ther., 28(12), pp.1147-1158.
[7] L. Wang (2020), Advances in targeted therapy for malignant lymphoma.,Signal Tranduct. Target., 5, DOI: 10.1038/s41392-020-0113-2.
[8] G. Dotti (2014), Design and development of therapies using CAR-expressing T cells.,Immunol. Rev., 257(1), pp.107-126.
[9] J. Hartmann (2017), Clinical development of CAR T cells-challenges and opportunities in translating innovative treatment concepts.,EMBO Mol. Med., 9, pp.1183-1197.
[10] D. Fesnak; C.H. June; B.L. Levine (2016), Engineered-T-cells-the-promise-and challenges of cancer immunotherapy.,Nat. ReV. Cancer, 16, pp.566-581.