Tạo dòng và biểu hiện interleukin 2 (IL-2) người tái tổ hợp trong Escherichia coli

Chỉ số đề mục

Lĩnh vực nghiên cứu

Ung thư học và phát sinh ung thư

Dạng tài liệu

Tác giả

Ngô Thị Kim Hằng, Nguyễn Phan Viễn Phương, Trần Nguyễn Thảo Sương, Trần Văn Hiếu⁽¹⁾

Nhan đề

Tạo dòng và biểu hiện interleukin 2 (IL-2) người tái tổ hợp trong Escherichia coli

Nhan đề tiếng anh

Nguồn trích

Tạp chí Khoa học - Đại học Cần Thơ

Năm xuất bản

2020

Số

2

Trang

53-58

ISSN

1859-2333

Từ khóa

E. coli, Interleukin 2, Origami, Thể vùi, Ung thư, Điều trị

Từ khóa tiếng anh

Tóm tắt

Liệu pháp miễn dịch sử dụng interleukin 2 (IL-2) đã được FDA chấp thuận sử dụng cho việc điều trị một số bệnh ung thư và hỗ trợ điều trị HIV/AIDS. Nhằm mục tiêu sản xuất IL-2 tái tổ hợp với giá thành rẻ, đề tài được triển khai nhằm dòng hóa và biểu hiện IL-2 trong Escherichia coli. Gen il2 được khuếch đại bằng phương pháp PCR sử dụng khuôn là plasmid pIDT-IL2 với cặp mồi đặc hiệu IL2-F và IL2-R chứa vị trí nhận biết của enzyme BamHI và NdeI. Sản phẩm khuếch đại được xử lý với enzyme BamHI và NdeI và chèn vào vector biểu hiện pET-His tạo nên plasmid tái tổ hợp pET-il2. Plasmid pET-il2 được biến nạp vào E. coli Origami(DE3) tạo nên dòng tái tổ hợp Origami(DE3)/pET-il2. Dòng tế bào này khi được cảm ứng biểu hiện bằng 0,5 mM IPTG đã tạo protein IL-2 biểu hiện vượt mức ở dạng thể vùi trong tế bào chất. Sự biểu hiện protein mục tiêu được kiểm chứng bằng SDS-PAGE và lai Western với kháng thể kháng protein IL-2.

Tóm tắt tiếng anh

Kí hiệu kho

TTKHCNQG, CVv 403

File toàn văn

Xem toàn văn

Tài liệu tham khảo

[1] Laemmli, U.K. (1970), Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4,Nature. 227(5259): 680–685
[2] Jiang, T., Zhou, C. and Ren, S. (2016), Role of IL-2 in cancer immunotherapy. 5(6): e1163462,
[3] Rosenberg, S.A. (2014), IL-2: The First Effective Immunotherapy for Human Cancer,The Journal of Immunology. 192(12): 5451-5458
[4] (2018), International Agency for Research on Cancer,accessed in May 2019. Available f-rom: https://gco.iarc.fr/today/data/factsheets/popul ations/704-viet-nam-fact-sheets.pdf
[5] Globocan (2018), International Agency for Research on Cancer,accessed in May 2019. Available f-rom: http://gco.iarc.fr/today/data/factsheets/popula tions/900-world-fact-sheets.pdf
[6] Sambrook, J.F. and Russell, D.W. (2001), Molecular Cloning, A laboratory Manual, Third Edition,Cold Spring Habor. NewYork, 2.344 pages
[7] Terpe, K. (2006), Overview of bacterial expression systems for heterologous protein production: f-rom molecular and biochemical fundamentals to commercial systems,Applied Microbiology and Biotechnology. 72(2): 211-222.
[8] Gaffen, S.L. and Liu, K.D. (2004), Overview of interleukin-2 function, production and clinical applications,Cytokine. 28(3): 109-23