Một xét nghiệm Polymerase Spiral Reaction mới để phát hiện nhanh các gen Staphylococcus aureus kháng penicillin

Chỉ số đề mục

Lĩnh vực nghiên cứu

Khoa học kỹ thuật và công nghệ

Dạng tài liệu

BB

Tác giả

Vũ Quang Hiếu, Phan Văn Thạch, Trần Hồng Diễm⁽²⁾, Trần Thị Quỳnh Như, Đặng Hữu Nghĩa, Nguyễn Hồng Phúc, TRẦN THỊ QUÝ⁽¹⁾

Nhan đề

Một xét nghiệm Polymerase Spiral Reaction mới để phát hiện nhanh các gen Staphylococcus aureus kháng penicillin

Nhan đề tiếng anh

A novel Polymerase Spiral Reaction assay for the rapid detection of penicillin-resistant Staphylococcus aureus genes

Nguồn trích

Tạp chí Khoa học và Công nghệ - Đại học Nguyễn Tất Thành

Năm xuất bản

2023

Số

4

Trang

20

ISSN

Từ khóa

Từ khóa tiếng anh

Tóm tắt

Bài báo đã phát triển phương pháp trực quan phản ứng phân tử nhằm phát hiện chủng Staphylococcus aureus kháng penicillin dựa trên phản ứng xoắn ốc polymerase (PSR). Phương pháp này thực hiện phản ứng trong điều kiện đẳng nhiệt bằng cách sử dụng enzyme Bst DNA polymerase và hai cặp mồi được thiết kế nhắm mục tiêu vào gen blaZ mã hóa tính kháng penicillin ở S. aureus. Khi khảo sát điều kiện phản ứng cho thấy, ở nhiệt độ 65 °C và nồng độ cặp mồi F2/R2 = 0,1 µM và F1-Nr/R1-N = 1,6 µM, thì phản ứng PSR cho kết quả tối ưu chỉ trong vòng 50 phút. Giới hạn phát hiện của phương pháp PSR với DNA bộ gen và tế bào vi khuẩn lần lượt là 10 pg/μL và 5 CFU/mL trên mỗi phản ứng, nhạy hơn so với phương pháp PCR. Ngoài ra, phương pháp này có tính đặc hiệu cao, do không xảy phản ứng chéo với các chủng vi khuẩn gây bệnh khác. Kết quả cho thấy phương pháp xét nghiệm PSR dễ thực hiện, có độ tin cậy cao; nên được ứng dụng để kiểm tra và khảo sát thực trạng kháng penicillin của S. aureus trong bệnh viện và cộng đồng.

Tóm tắt tiếng anh

In this study, a visual method was developed to detect and identify penicillin-resistant Staphylococcus aureus (PRSA) based on the polymerase spiral reaction (PSR). This method can be performed under isothermal conditions using Bst DNA polymerase and two-pair primers specifically designed to target the blaZ gene, which encodes penicillin-resistance in S. aureus. Investigation of reaction conditions showed that at the temperature of 65 °C and the concentration of primer pairs F2/R2 = 0.1 µM and F1-Nr/R1-N = 1.6 µM, the reaction gave optimal PSR result within only 50 minutes. The detection limit of PSR in genomic DNA and bacterial cells were 10 pg/μL and 5 CFU/mL, respectively, which were more sensitive than with standard PCR. In addition, this method was shown to be highly specific, as non-PRSA bacteria negligibly interfered with PRSA detection. These results indicated that a novel, effortless and reliable PSR assay developed in this study has potential application in the screening for penicillin-resistant of S. aureus in hospitals and communities.

Kí hiệu kho

File toàn văn

Xem toàn văn