BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  21,967,735
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Miễn dịch học thú y

Đặng Vũ Hoàng, Trần Thị Thanh Hà(1), Nguyễn Thị Huyền, Đặng Thị Kiều Anh, Lý Đức Việt, Nguyễn Thúy Duyên, Nguyễn Thế Vinh, Hoàng Việt Hưng, Takehiro Kokuho

Nghiên cứu tính sinh miễn dịch trên lợn của kháng nguyên PCV2-ORF2 tái tổ hợp bằng hệ thống biểu hiện baculovirus

Investigation on the immunogenicity in pigs of recombinant PCV2-ORF2 antigen based on baculovirus expression system

Khoa học Kỹ thuật Thú y

2018

5

27-34

1859-4751

Virus PCV2, Lợn, Protein tái tổ hợp, Vacxin tiểu phần, Baculovirus

Porcine circovirus type 2, Recombinant protein, Subunit vaccine

Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã tiến hành đánh giá tính sinh miễn dịch của kháng nguyên tái tổ hợp ORF2 của PCV2 và đánh giá khả năng bảo hộ chống lại vi rút PCV2 trên lợn. Kết quả nghiên cứu cho thấy, ở liều 106 và 107 pfu/ml, sau 42 ngày tiêm kháng nguyên ORF2 tái tổ hợp, hiệu giá kháng thể kháng vi rút PCV2 trong huyết thanh lợn tăng mạnh so với nhóm đối chứng (p<0,05 đối với liều 106 và p<0,01 đối với liều 107 pfu/ml). Ngoài ra, ở liều 107 pfu/ml, kháng thể đặc hiệu kháng PCV2 bắt đầu xuất hiện từ ngày 21 (p<0,05) và đạt đỉnh ở ngày thứ 42 (p<0,01) khi so với nhóm đối chứng tiêm PBS. Kết quả này cho thấy kháng nguyên ORF2 tái tổ hợp có tính sinh miễn dịch cao. Nhằm đánh giá khả năng bảo hộ của kháng thể kháng vi rút PCV2, chúng tôi tiến hành công cường độc lợn thí nghiệm ở 42 ngày sau khi tiêm và hàm lượng ARN của PCV2 được đánh giá bằng phản ứng RT-PCR bán định lượng (Semi-quantitative RT-PCR) sau 2 tuần công cường độc. Kết quả thí nghiệm cho thấy, hàm lượng ARN của PCV2 giảm mạnh cả ở hạch lympho và trong máu ở nhóm lợn tiêm kháng nguyên ORF2 khi so sánh với nhóm lợn đối chứng (p< 0,05). Từ các kết quả thu được, chúng tôi có thể kết luận, kháng nguyên ORF2 tái tổ hợp có tính sinh miễn dịch cao và là ứng viên tiềm năng để sản xuất vacxin tái tổ hợp phòng bệnh cho lợn có liên quan đến vi rút PCV2 ở Việt Nam.

In this study, the immunogenicity of recombinant ORF2 antigen of PCV2 was investigated and their ability to protect piglets against a PCV2 challenge was evaluated. The studied results showed that at doses of 106 and 107 pfu/ml, PCV2 specific antibodies were significantly increased in serum of the experimental pigs injected with ORF2 antigen in comparison with the control pig group (p<0,05 for dose of 106 pfu/ml and p<0,01 for dose of 107 pfu/ml). Additionally, at high dose (107 pfu/ml), PCV2 specific antibodies appeared at 21 days after first injection (p<0,05) and reached at peak at 42 days (p<0,01) when compared to PBS injection as the control. In order to assess the ability for protecting the piglets against PCV2 challenge, at day 42 after immunization with recombinant ORF2 antigen, the animals were challenged with virulent PCV2 strain and the efficacy in reducing the PCV2 load in lymph node and serum were determined by Semi-quantitative RT-PCR at day 14 after challenge. The results showed that, the viral loads were decreased significantly in both lymph nodes and serum when compared to the control (p<0,05). Finally, we can conclude that recombinant ORF2 antigen possessed high immunogenicity and this antigen would be a potential candidate for recombinant vaccine production against PCV2 in Viet Nam.

TTKHCNQG, CVv 65

Xem toàn văn
  • [1] Ellis, J., Hassard, L., Clark, E., Harding, J., Allan, G., Willson, P., Strokappe, J., Martin, K., McNeilly, F., Meehan, B., Todd, D., Haines, D (1998), Isolation of circovirus f-rom lesions of pigs with postweaning multisystemic wasting syndrome,Can. Vet. J. 39 (1), 44–51
  • [2] Lukert, P., G. F. de Boer, J. L. Dale, P. Keese, M. S. McNulty, J. W. Randles, and I. Tischer (1995), The Circoviridae,p. 166–168.
  • [3] Tischer, I., H. Gelderblom, W. Vettermann, and M. A. Koch (1982), A very small porcine virus with circular single-stranded DNA,Nature 295:64–66
  • [4] Van Oers MM (2006), Vaccines for viral and parasitic diseases produced with baculovirus vectors.,Adv Virus Res.;68:193-253
  • [5] Trần Thị Thanh Hà, Lý Đức Việt, Nguyễn Thị Huyền, Nguyễn Thị Lương, Đặng Thị Kiều Anh, Đặng Vũ Hoàng và Takehiro Kokuho (2017), Đánh giá ảnh hưởng tiềm năng của Interferon alpha trong đáp ứng miễn dịch của lợn được tiêm kháng nguyên GP5 tái tổ hợp của virus tai xanh.,Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y số 1
  • [6] Đặng Vũ Hoàng, Trương Quốc Phong, Trần Thị Thanh Hà, Nguyễn Thị Huyền, Takehiro Kokuho và cs. (2016), Ứng dụng hệ thống biểu hiện baculovirus nhằm sản xuất protein ORF2 tái tổ hợp của virus PCV2,Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y số 2.
  • [7] Jiying Wang, Yanping Wang, Huaizhong Wang, Xiaojing Hao1, Ying Wu, Jianfeng Guo (2013), Se-lection of Reference Genes for Gene Expression Studies in Porcine Whole Blood and Peripheral Blood Mononuclear Cells under Polyinosinic:Polycytidylic Acid Stimulation Australas.,J. Anim. Sci. Vol. 27, No. 4 : 471-478
  • [8] Ann-Britt Nygard, Claus B Jørgensen, Susanna Cirera and Merete Fredholm (2007), Se-lection of reference genes for gene expression studies in pig tissues using SYBR green qPCR,
  • [9] Dang VH, Choi KC and Jeung EB (2010), Membrane-impermeable estrogen is involved in regulation of calbindin-D9k expression via non-genomic pathways in a rat pituitary cell line, GH3 cells.,Toxicol in Vitro 2010; 24:1229-1236
  • [10] Dang VH, Nguyen TH, Lee GS, Choi KC and Jeung EB (2009), In vitro exposure to xenoestrogens evokes the transcriptional level of growth hormone gene and its release via estrogen receptor-dependent pathway in a rat pituitary cell line, GH3,Steroids 74:707-714
  • [11] Allan, G. M., F. McNeilly, S. Kennedy, B. Daft, E. G. Clarke, J. A. Ellis, D. M. Haines, B. M. Meehan, and B. M. Adair (1998), Isolation of porcine circovirus-like viruses f-rom pigs with a wasting disease in the USA and Europe.,J. Vet. Diagn. Investig. 10:3–10
  • [12] Paolo Martelli, Luca Ferrari, Marina Morganti, Elena De Angelis, Paolo Bonilauri, Stefano Guazzetti, Antonio Caleffi, Paolo Borghetti (2011), One dose of a porcine circovirus 2 subunit vaccine induces humoral and cell-mediated immunity and protects against porcine circovirusassociated disease under field conditions,J. Vet. Microb. 149; 339–351
  • [13] Hui-Gang Shen,Ji-Yong Zhou, Zhen-Yu Huang,1 Jun-Qing Guo, Gang Xing, Jia-Ling He, Yan Yan and Li-Yang Gong (2008), Protective immunity against porcine circovirus 2 by vaccination with ORF2-based DNA and subunit vaccines in mice.,Journal of General Virology, 89, 1857–1865
  • [14] Bai B, Lu X, Meng J, Hu Q, Mao P, Lu B, Chen Z, Yuan Z, Wang H (2008), Vaccination of mice with recombinant baculovirus expressing spike or nucleocapsid protein of SARS-like coronavirus generates humoral and cellular immune responses,Mol Immunol. 45: 868-75
  • [15] Yu-Chen H, Kun Y, Tzong-Yuan W (2008), Baculovirus as an expression and/or delivery vehicle for vaccine antigens,Expert Review of Vaccines 7: 363-371
  • [16] Gould AR (2004), Virus evolution: disease emergence and spread,Aust. J. experim. Agric., 44: 1085-1094
  • [17] Martijan AL, German RA, Klass M, Van GW (2007), Production of sumoylated proteins using a baculovirus expression system,J. Virol. Methods, 139: 189-194