Nghiên cứu biểu hiện enzyme AA10 trong E. coli

Chỉ số đề mục

Lĩnh vực nghiên cứu

Sinh học phân tử

Dạng tài liệu

Tác giả

Ngô Thị Cẩm Nhung⁽¹⁾, Vũ Văn Vân

Nhan đề

Nghiên cứu biểu hiện enzyme AA10 trong E. coli

Nhan đề tiếng anh

Study on AA10 expression in E. coli

Nguồn trích

Tạp chí Khoa học và Công nghệ (Đại học Nguyễn Tất Thành)

Năm xuất bản

2021

Số

14

Trang

1-5

ISSN

2615-9015

Từ khóa

AA10, E. coli, biểu hiện, GbpA, Polysaccharide monooxygenase

Từ khóa tiếng anh

AA10, E. coli, Expression, GbpA, Polysaccharide monooxygenase

Tóm tắt

Protein bám GlcNAc (GbpA) là một nhân tố độc lực của chủng gây bệnh Vibrio vulnificus. Domain 1 của GbpA bám dính ở cả bề mặt của ruột người và chitin. Cấu trúc của tiểu phần 1 tương đồng với một loại enzyme polysaccharide monooxygenase có thể thực hiện phản ứng oxy hóa đối với các chuỗi chitin khó phá vỡ. Vai trò của tiểu phần VvPMO10 trong hoạt động xúc tác hiện nay vẫn chưa được mô tả đầy đủ trong in vitro. Đối tượng của nghiên cứu này là VvPMO10, protein này được dòng hóa vào hệ thống biểu hiện pET22b và biến nạp vào trong tế bào E. coli BL21 (DE3). Protein tái tổ hợp được biểu hiện ở điều kiện 37℃ khi cảm ứng với IPTG. Protein tổng được kiểm tra bằng phương pháp SDS-PAGE và nhuộm phát hiện bằng dung dịch Coomassie blue. Vạch protein mục tiêu thu được có kích thước 20kDa tương tự kích thước lý thuyết, chứng tỏ protein tái tổ hợp đã được biểu hiện thành công trong chủng E. coli BL21 (DE3). Kết quả này đóng góp dữ liệu cho những nghiên cứu tiếp theo.

Tóm tắt tiếng anh

The GlcNAc-binding protein A (GbpA) has been known as a virulent factor of Vibrio vulnificus pathogen. Domain 1 of GbpA adhesion takes responsibility of binding both human intestine and the chitin surface. The domain 1 structure is similar to a polysaccharide monooxygenase (PMO) AA10-type (PMO), which catalyzed oxidation toward the recalcitrant chitin polymer. The role of the VvPMO10 module in catalytic functions has not been fulfilled characterized. To aim at the VvPMO10, this protein was cloned to the pET22b system and transformed into the E. coli BL21 (DE3) strain. The recombinant protein was expressed at 37 0C with induced IPTG. Total protein was checked by SDS-PAGE method and stained using Coomassie blue solution. The target band showed a band of 20 kDa as expectation. Thus, the heterologous protein was expressed successfully in E. coli BL21 (DE3) strain and becomes the materials for future study.

Kí hiệu kho

TTKHCNQG, CVv 503

File toàn văn

Xem toàn văn