BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  22,334,443
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Hoá hữu cơ

Lê Quỳnh Loan, Vũ Văn Vân, Nguyễn Phước Khải Hoàn, Trần Văn Hiếu(1), Nguyễn Minh Hùng

Thiết kế vector biểu hiện pPICZaA mang gen MGG00245 mã hóa cho enzyme PMO

Tạp chí Khoa học & Công nghệ Đại Học Duy Tân

2020

3

59-65

1859-4905

Polysaccharide monooxygenase, PMO, Pichia pastoris, Biểu hiện, Protein

Các enzyme polysacharide monooxygenase (PMO) có nguồn gốc từ nhiều chủng nấm và vi khuẩn, được biết đến với khả năng phân hủy các polysaccharide bền như chitin, cellulose và tinh bột. Chúng có tiềm năng ứng dụng cao trong việc tăng hiệu quả phân hủy polysaccharide, tuy nhiên vẫn chưa được nghiên cứu và việc chủ động được nguồn protein là vô cùng quan trọng cho các nghiên cứu về sau. Vì vậy, chúng tôi đã tiến hành thiết kế vector biểu hiện pPICZaA mang gen mã hóa cho PMO (pPICZaA-PMO) nhằm sản xuất protein PMO tái tổ hợp bằng chủng nấm men Pichia pastoris. Đầu tiên, chúng tôi đã tối ưu hóa codon cho gen mã hóa PMO để phù hợp chủng chủ. Tiếp đến, vector pPICZaA-PMO được tạo ra bằng kĩ thuật gen. Sau đó, vector tái tổ hợp được biến nạp vào chủng chủ P. pastoris X33. Kết quả thu được, chúng tôi đã tạo thành công vector tái tổ hợp pPICZaA-PMO và biến nạp thành công vào chủng nấm men P. pastoris X33. Đây là cơ sở để chúng tôi tiếp tục sản xuất PMO tái tổ hợp cho các nghiên cứu về sau.

TTKHCNQG, CVv 416

Xem toàn văn
  • [1] Beeson, W.T. (2012), Oxidative cleavage of cellulose by fungal copper-dependent polysacc-haride monooxygenases.,Journal of the American Chemical Society, 2012. 134: p. 890-892.
  • [2] Phillips, C.M. (2011), Cellobiose Dehydrogenase and a Copper-Dependent Polysacc-haride Monooxygenase Potentiate Cellulose Degradation by Neurospora crassa.,ACS Chemical Biology, 2011. 6: p. 1399-1406.
  • [3] Quinlan, R.J. (2011), Insights into the oxidative degradation of cellulose by a copper metalloenzyme that exploits biomass components.,Proceedings of the National Academy of Sciences, 2011. 108: p. 15079-15084.
  • [4] Harris, P.V. (2010), Stimulation of lignocellulosic biomass hydrolysis by proteins of glycoside hydrolase family 61: Structure and function of a large, enigmatic family.,Biochemistry, 2010. 49: p. 3305-3316.
  • [5] Vu, V.V. (2014), A family of starch-active polysacc-haride monooxygenases.,Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2014. 111: p. 13822-13827.
  • [6] Lo Leggio, L. (2015), Structure and boosting activity of a starch-degrading lytic polysacc-haride monooxygenase.,Nature Communications, 2015. 6: p. 5961.
  • [7] Hemsworth, G.R. (2014), Discovery and c-haracterization of a new family of lytic polysacc-haride monooxygenases.,Nature chemical biology, 2014. 10: p. 122-126.
  • [8] Vaaje-Kolstad, G. (2010), An Oxidative Enzyme Boosting the Enzymatic Conversion of Recalcitrant Polysacc-harides.,Science, 2010. 330: p. 219-222.
  • [9] Beeson, W.T. (2015), Cellulose Degradation by Polysacc-haride Monooxygenases.,Annual Review of Biochemistry, 2015. 84: p. 923-946.
  • [10] Forsberg, Z. (2014), Comparative study of two chitinactive and two cellulose-active AA10-type lytic polysacc-haride monooxygenases.,Biochemistry, 2014. 53: p. 1647-1656.
  • [11] Yakovlev, I. (2012), Substrate-specific transcription of the enigmatic GH61 family of the pathogenic white-rot fungus Heterobasidion irregulare during growth on lignocellulose.,Applied Microbiology and Biotechnology, 2012. 95: p. 979-990.
  • [12] Tian, C. (2009), Systems analysis of plant cell wall degradation by the model filamentous fungus Neurospora crassa.,Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 2009. 106: p. 22157-22162.
  • [13] Hemsworth, G.R., G.J. Davies, P.H. Walton (2013), Recent insights into copper-containing lytic polysacc-haride mono-oxygenases.,Current Opinion in Structural Biology, 2013. 23: p. 660-668
  • [14] Horn, S.J. (2012), Novel enzymes for the degradation of cellulose.,Biotechnology for Biofuels, 2012. 5: p. 45