Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  22,334,443
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Vi rút học thú y

Mai Quốc Gia, Lê Văn Ngọc Trân, Trần Văn Hiếu(1)

Tạo dòng, biểu hiện nhân tố bám dính F18 trên bề mặt tế bào nấm men Pichia pastoris

Cloning and surface expression of F18 fimbria on Pichia pastoris’s cell wall

Khoa học (ĐH Cần Thơ)

2020

6B

139-145

1859-2333

Tiêu chảy sau cai sữa (post-weaning diarrhea, PWD) là bệnh thường gặp ở heo con, gây tổn thất kinh tế nặng nề. Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) là một trong những nguyên nhân chủ yếu gây PWD. Chủng vi khuẩn này đặc trưng bởi hai yếu tố gây bệnh là nhân tố bám dính thành ruột, và các độc tố gây mất nước. Các nghiên cứu gần đây đã chỉ ra rằng tiên mao F18 và F4 là hai kháng nguyên bám dính phổ biến nhất ở các chủng ETEC trong nước và trên thế giới. Vaccine là biện pháp ngăn ngừa PWD hữu hiệu và kinh tế, đặc biệt là vaccine uống với khả năng kích thích hệ miễn dịch đường ruột. Hiện nay vacccine uống phòng ETEC/F4 đã được thương mại hóa, tuy nhiên nhân tố bám dính F18 vẫn gặp nhiều khó khăn trong việc kích thích miễn dịch niêm mạc ruột. Ở nghiên cứu này, hệ thống nấm men Pichia pastoris biểu hiện nhân tố bám dính F18 trên bề mặt được phát triển và đánh giá khả năng biểu hiện trên màng. Kết quả cho thấy F18 đã được biểu hiện trong phân đoạn màng của P. pastoris. Hệ thống biểu hiện trên bề mặt nấm men P. pastoris này có thể được ứng dụng nhằm tạo ra vaccine uống giá rẻ và hiệu quả.

Post-weaning diarrhea (PWD) is one of the most common diseases endamaging the swine industry worldwide. Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) is the main pathogen associated with PWD in piglets. The most important virulences are adhesion factors and enterotoxins. F4 and F18 are the two fimbriae frequently detected in ETEC. Vaccine is a powerful, cost-effect approach to defend against PWD. Especially, oral vaccine can stimulate mucosal immunity. Nowadays, ETEC/F4 vaccine is commercially available, but F18 fimbria is still difficult to induce mucosal immune response. In this study, a Pichia pastoris cell-surface display system of F18 subunit was created, and evaluated its expression on the cell wall. This surface expression system on P. pastoris’ cell wall could be exploited for budget yet efficient oral vaccine development.

TTKHCNQG, CVv 403

  • [1] Wojciechowicz, D.; Lu, C. F.; Kurjan, J.; Lipke, P. N. (1993), Cell surface anchorage and ligandbinding domains of the Sacc-haromyces cerevisiae cell adhesion protein alpha-agglutinin, a member of the immunoglobulin superfamily,Mol Cell Biol. 13(4): 2554-2563
  • [2] Wang, Q.; Li, L.; Chen, M.; Qi, Q.; Wang, P. G. (2007), Construction of a novel system for cell surface display of heterologous proteins on Pichia pastoris,Biotechnol Lett. 29(10): 1561-1566
  • [3] Tiels, P.; Verdonck, F.; Coddens, A.; Goddeeris, B.; Cox, E. (2008), The excretion of F18+ E. coli is reduced after oral immunisation of pigs with a FedF and F4 fimbriae conjugate,Vaccine. 26(17): 2154-2163
  • [4] Tiels, P.; Verdonck, F.; Coddens, A.; Ameloot, P.; Goddeeris, B.; Cox, E. (2007), Monoclonal antibodies reveal a weak interaction between the F18 fimbrial adhesin FedF and the major subunit FedA,Vet Microbiol. 119(2-4): 115-120
  • [5] Taguchi, Y.; Schatzl, H. M. (2014), Small-scale Triton X-114 Extraction of Hyd-rophobic Proteins,Bio Protoc. 4(11)
  • [6] Smeds, A.; Hemmann, K.; Jakava-Viljanen, M.; Pelkonen, S.; Imberechts, H.; Palva, A. (2001), C-haracterization of the Adhesin of Escherichia coli F18 fimbriae,Infect Immun. 69(12): 7941-7945
  • [7] Rupprecht, K. R.; Nair, R. K.; Harwick, L. C., et al. (2010), Development of a dot-blot assay for screening monoclonal antibodies to lowmolecular-mass drugs,Anal Biochem. 407(2): 160-164
  • [8] Rhouma, M.; Fairbrother, J. M.; Beaudry, F.; Letellier, A. (2017), Post weaning diarrhea in pigs: Risk factors and non-colistin-based control strategies,Acta Vet Scand. 59(1): 31
  • [9] Shusta, E. V.; Pepper, L. R.; Cho, Y. K.; Boder, E. T. (2008), A decade of yeast surface display technology: Whe-re are we now?,Combinatorial Chemistry & High Throughput Screening. 11(2): 127-134
  • [10] Nadeau, E.; Tremblay, D.; Bélanger, L., et al. (2016), Field efficacy of Coliprotec® F4, live oral vaccine against post-weaning diarrhoea caused by F4-enterotoxigenic E. coli (F4-ETEC), in German pig farms,24th International Pig Veterinary Congress, June 2016, Dublin, Ireland
  • [11] Luppi, A.; Gibellini, M.; Gin, T., et al. (2016), Prevalence of virulence factors in enterotoxigenic Escherichia coli isolated f-rom pigs with post-weaning diarrhoea in Europe,Porcine Health Manag. 2: 20
  • [12] Kempf, I.; Fleury, M. A.; Drider, D., et al. (2013), What do we know about resistance to colistin in Enterobacteriaceae in avian and pig production in Europe?,Int J Antimicrob Agents. 42(5): 379-383
  • [13] Holland, R. E. (1990), Some infectious causes of diarrhea in young farm animals,Clinical Microbiology Reviews. 3(4): 345-375
  • [14] Grange, P. A.; Mouricout, M. A.; Levery, S. B.; Francis, D. H.; Erickson, A. K. (20025), Evaluation of receptor binding specificity of Escherichia coli K88 (F4) fimbrial adhesin variants using porcine serum transferri and glycosphingolipids as model receptors,Infect Immun. 70(5): 2336-2343
  • [15] Fairbrother, J. M.; Nadeau, E.; Gyles, C. L. (2005), Escherichia coli in postweaning diarrhea in pigs: an up-date on bacterial types, pathogenesis, and prevention strategies,Anim Health Res Rev. 6(1): 17-39 2005
  • [16] Thuy, N. D.; Phu, H. C.; Huyen, X. N., et al. (2006), Pathotypes and serogroups of enterotoxigenic Escherichia coli isolated f-rom pre-weaning pigs in north Vietnam,J Med Microbiol. 55(Pt 1): 93-99
  • [17] Davitt, C. J.; Lavelle, E. C. (2015), Delivery strategies to enhance oral vaccination against enteric infections,Adv Drug Deliv Rev. 91: 52-69
  • [18] Asada, H.; Uemura, T.; Yurugi, K. T., et al. (2011), Evaluation of the Pichia pastoris expression system for the production of GPCRs for structural analysis,Microb Cell Fact. 10: 24
  • [19] Ahmad, M.; Hirz, M.; Pichler, H.; Schwab, H. (2014), Protein expression in Pichia pastoris: recent achievements and perspectives for heterologous protein production,Appl Microbiol Biotechnol. 98(12): 5301-5317