BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  28,136,358
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Miễn dịch học thú y

Nguyễn Thị Thu Hằng(1), Nguyễn Hùng Chí, Chu Hoàng Hà, Nguyễn Trung Nam

Nghiên cứu tạo chủng virus tái tổ hợp làm giống gốc cho sản xuất vacxin cúm gia cầm A/H5N1 bằng kỹ thuật di truyền ngược

Generating recombinant virus as a seed strain for producing A/H5N1 Avian influenza vaccine by reverse genetics

Khoa học Kỹ thuật thú y

2020

1

5-11

1859 - 4751

Nghiên cứu, Tạo chủng virus, Tái tổ hợp, Giống gốc, Sản xuất vacxin, Cúm gia cầm A/H5N1, Kỹ thuật di truyền ngược

Reverse genetics, Recombinant, Vaccine, A/H5N1 Avian influenza virus

Kỹ thuật di truyền ngược được ứng dụng trong tạo virus cúm A/H5N1 clade 1.1 tái tổ hợp (rg-A/H5N1 clade 1.1)làmứng viên cho sản xuất vacxin cúmgia cầm. Hiệu quả tái tạo virus đạt cao nhất khi chuyển nhiễm hệ thống 6 + 2 plasmid đơn gen mang 6 phân đoạn gen khung nguồn gốc từ virusA/PuertoRico/8/34(H1N1) và 2 phân đoạn gen kháng nguyên H5 HA (đã được loại bỏ vùng độc) và N1 NA từ virus A/duck/Vietnam/ ST0970/2009(H5N1) (clade 1.1) vào tế bào 293T trong sự có mặt của Lipofectamine-2000 trong thời gian 30 phút. Chủng virus ứng viên vacxin đã được kiểm tra là chủng độc lực thấp, có tính ổn định di truyền gen kháng nguyên H5 và N1, có khả năng thích ứng nhân lên trong trứng gà có phôi với hiệu giá HAcao. Vacxin vô hoạt nhũ dầu được sản xuất từ chủng virusrg-A/H5N1 clade 1.1 đảm bảo tính an toàn và có khả năng kích thích sinh đáp ứng miễn dịch tạo kháng thể đặc hiệu ở gà sạch 3 ngày tuổi 20/20 gà tiêm phòng vacxin (1024 HAU) có hiệu giá kháng thể HI ≥ 4 log2 sau 2 tuần và 4 tuần tiêm phòng.

Reverse genetics was applied to generate recombinant A/H5N1, clade 1.1 avian influenza virus (rg-A/H5N1 clade 1.1) as a candidate virus for producing vaccine against avian influenza viruses. Recombinant viruses were recovered at the highest titer using 8-plasmid DNA transfection system (62 plasmids) containing six backborn gene segments from A/PuertoRico/8/34(H1N1) virus and two H5 (the multi-basic site was removed) and N1 antigen gene segments of A/duck/Vietnam/ ST0970/2009(H5N1) (clade 1.1) virus into 293T cells under stimulation of lipofectamine-2000 reagents for 30 minutes. The vaccine candidate strain was confirmed as a low pathogenicity avian influenza virus (LPAIV), presented genetic stability of the H5 and N1 antigen genes and grew at high yields in embryonated chicken eggs. Inactivated oil-emulsion vaccine producing from rg-A/ H5N1, clade 1.1 virus presented ability in inducing immunogenicity to produce specific antibodies in 3-days-old pathogen-free chickens. 100% of vaccinated chickens (1024 HAU) presented HI (log2) antibody titers ≥ 4.0 after 2 and 4 weeks of vaccination.

TTKHCNQG, CVv 65

Xem toàn văn
  • [1] Xue J, Chambers BS, Hensley SE, Lopez CB (2016), Propagation and c-haracterization of influenza virus stocks that lack high levels of defective viral genomes and hemagglutinin mutations.,Front Microbiol 7: 326.
  • [2] (2011), Manual for the laboratory diagnosis and virological surveillance of influenza: 35-114.,
  • [3] (2018), Guidelines for the safe development and production of vaccines 6 to human pandemic influenza viruses and viruses with 7 pandemic potential: 3-45.,
  • [4] Suzuki T. Takahashi T, Guo CT, Hidari KI, Miyamoto D. Goto H, Kawaoka Y, Suzuki Y (2005), Sialidase activity of influenza A virus 111 an endocytic pathway enhances viral replication.,J Virol 79 (18): 11705-11715.
  • [5] Nguyền Thị Thu Hằng. Nguyền Hùng Chí, Hoàng Thị Thu Hằng, Vũ Huyền Trang, Chu Hoàng Hà, Nguyễn Trung Nam (2017), Tách dòng sáu gen khung virus cúm vào vector pHW2000 phục vụ tạo chung gổc vaccine cúm A/H5N1 bằng kỳ thuật di truyền ngược.,Tạp chỉ Khoa học Đại học Quôc gia Hà Nội 33(2): 9-16.
  • [6] Nguyền Thị Thu Hằng, Hoàng Thị Thu Hằng. Nguyền Hùng Chí, Chu Hoàng Hà, Nguyễn Trung Nam (2017), Nhân dòng vector pHW2000 tái tô hợp mang gen HA làm nguyên liệu tạo chủng gốc ứng dụng san xuất vaccine cúm A/H5N1.,Tạp chí Khoa học Đại học Quốc gia Hà A'pZ 33(1 s ): 159-167.
  • [7] Krammer F, Palese P (2015), Advances in the development of influenza virus vaccines.,Nat Rev Drug Discov 143v : 167-182
  • [8] Jang JW, Lee CY, Kim IH, Choi JG, Lee YJ, Yuk ss, Lee JH, Song c s, Kim JH, Kwon HJ (2017), Optimized clade 2.3.2.1C H5NI recombinant-vaccine strains against highly pathogenic avian influenza.,J Vet Sci 18(S1): 299-306.
  • [9] Hoffmann E. Stech J, Guan Y. Webster RG, Perez DR (2001), Universal primer set for the full-length amplification of all influenza A viruses.,Arch Virol 146: 2275-2289.