Nghiên cứu khả năng tái sinh và chuyển gen chỉ thị vào giống dưa chuột choka f1

Chỉ số đề mục

Lĩnh vực nghiên cứu

40104 - Cây rau, cây hoa và cây ăn quả

Dạng tài liệu

Tác giả

Hoang Thi Huyen Trang⁽¹⁾, Hoàng Khánh Linh, Nguyễn Thị Linh, Trịnh Đình Duy, Lê Thị Như Thảo, Phạm Bích Ngọc, Chu Hoàng Hà, Đỗ Tiến Phát

Nhan đề

Nghiên cứu khả năng tái sinh và chuyển gen chỉ thị vào giống dưa chuột choka f1

Nhan đề tiếng anh

Study in vitro regeneration and transformation systems of cucumber variety choka f1 using gus reporter gene

Nguồn trích

Khoa học và Công nghệ - Đại học Thái Nguyên

Năm xuất bản

2021

Số

1

Trang

83-91

ISSN

1859-2171

Từ khóa

Dưa chuột, Tái sinh, A. tumefaciens, Chuyển gen, Choka F1

Từ khóa tiếng anh

Cucumber, Regeneration, A. tumefaciens, Transformation, Choka F1

Tóm tắt

Nghiên cứu này được tiến hành với mục đích phát triển quy trình tái sinh và chuyển gen thông qua vi khuẩn A. tumefaciens ở cây dưa chuột tạo cơ sở cho nghiên cứu chuyển các gen mục tiêu mang các tính trạng quý cũng như chỉnh sửa hệ gen trên các giống dưa chuột tại Việt Nam. Trong quy trình này, điều kiện khử trùng phù hợp là sử dụng NaClO 15% trong thời gian 15 phút. Tỉ lệ mẫu tạo đa chồi đạt 61,76% và số chồi trung bình đạt 2,45 chồi/ cụm mẫu cấy trên môi trường MS bổ sung 1,5 mg/L BAP và 1 mg/L ABA. Tỷ lệ chồi phát sinh rễ và tạo cây hoàn chỉnh dao động từ 45% đến 85% trên môi trường cơ bản MS với 20 g/L sucrose. Cây con được chuyển ra, thích nghi và sinh trưởng trong điều kiện nhà lưới đạt tỷ lệ sống 66,67% trên giá thể vermiculite. Thành phần môi trường và các bước tái sinh được sử dụng trong biến nạp gen chỉ thị gus vào giống dưa chuột Choka F1 thông qua vi khuẩn A. tumefaciens. Sự có mặt và biểu hiện của gen chỉ thị gus trong các dòng dưa chuột chuyển gen được khẳng định thông qua phản ứng PCR với cặp mồi đặc hiệu và phương pháp nhuộm GUS, tỷ lệ chuyển gen bước đầu ghi nhận đạt 9,44%.

Tóm tắt tiếng anh

This study was performed to establish and develop efficient procedures for Agrobacterium-mediated transformation and regeneration of an inbred cucumber cultivar, which provides a potential protocol to transfer gene of interest into cucumber as well as further research on genome editing in cucumber in Vietnam. In this procedure, cucumber seed sterilization was well performed using 15% NaClO for 15 min. The frequency of multiple shoot induction was 61.76% and the number of regenerated shoots per sample was 2.45 on MS basal medium added 1.5 mg/L BAP and 1 mg/L ABA. The rooting frequency ranged from 45% to 85% and the whole regenerated plants were formed on MS medium supplemented with 20 g/L sucrose. The in vitro regenerated cucumber plants were successfully transferred and grown on vermiculite under greenhouse conditions with a survival rate of 66.67%. These medium components and the regeneration procedure were successfully utilized to transfer gus reporter gene into the Choka F1 variety using the Agrobacterium-mediated method. The GUS staining and PCR analysis using specific primers demonstrated the presence and expression of gus gene in transgenic cucumber lines. The transformation frequency was preliminary recorded at 9.44%.

Kí hiệu kho

TTKHCNQG, CTv 178

File toàn văn

Xem toàn văn