HỆ THỐNG THÔNG TIN QUỐC GIA VỀ KHOA HỌC, CÔNG NGHỆ VÀ ĐỔI MỚI SÁNG TẠO
Lọc theo danh mục
liên kết website
Lượt truy cập
Lượt truy cập :
30,220,830
- Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam
76
Huyết học và truyền máu
BB
Cấn Văn Mão, Lê Duy Cương(1)
Đánh giá chất lượng của tế bào CAR-T nhận biết protein CD19 để điều trị bệnh bạch cầu lympho cấp
Evaluating the quality of CAR-T cells recognizing CD19 protein for the acute lymphoblastic leukemia treatment
Y học Cộng đồng
2025
03
269-275
2354-0613
Nghiên cứu tiến hành đánh giá chất lượng của tế bào CAR - T in vitro trong ứng dụng liệu pháp tế bào CAR - T điều trị bệnh bạch cầu lympho cấp. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Tế bào CAR - T CD19RCD137/pMC và CAR - T CD19RCD137 - iCasp9 - IL15/pMC được nuôi cấy để xác định tính vô trùng. Kiểm tra sản phẩm mẫu dịch tế bào đạt tiêu chuẩn về giới hạn nội độc tố. Sau đó tách chiết protein bằng kỹ thuật điện di SDS page và westen blotting. Dựng đường chuẩn albumin và định lượng protein E. coli bằng hệ thống phân tích Western Blot. Đánh giá biểu hiện của mRNA E. coli bằng kỹ thuật real - time PCR. Kết quả: Giới hạn phát hiện nội độc tố: 0,005 - 0,5 EU/ml, nồng độ nội độc tố < 0,045 EU/ml. Tế bào CAR - T đảm bảo vô trùng. Xây dựng đường chuẩn với 1 ml dịch nuôi có chứa 352,585 μg protein. Trọng lượng khối cặn protein tổng số trong 1 ml dịch nuôi là 1,15 mg, lượng protein tổng số chiếm 3,3 %. Tỉ lệ protein E. coli có trong mẫu dịch nuôi cấy tế bào CAR - T là 0,06 - 0,21%. Mẫu dịch nuôi cấy tế bào CAR - T tại các thời điểm ngày 3, 7 và 14 không biểu hiện E. coli. Kết luận: Kết quả cấy khuẩn, định lượng nội độc tố endotoxin và protein E. coli cho thấy sản phẩm tế bào CAR - T đáp ứng chất lượng.
Evaluating the quality of CAR - T cells for CAR - T cell therapy in vitro treats acute lymphoblastic leukemia. Research subjects and methods: CAR - T CD19RCD137/pMC and CAR - T CD19RCD137 - iCasp9 - IL15/pMC cells were cultured to determine sterility. The cell suspension sample product was tested the endotoxin limit standard. Then, the protein was extracted by SDS page electrophoresis and western blotting. The albumin standard curve was constructed and E. coli protein was quantified using a Western Blot analysis system. Evaluating the expression of E. coli mRNA using real - time PCR. Results: Endotoxin detection limit: 0.005 - 0.5 EU/ml, endotoxin concentration < 0.045 EU/ml. CAR - T cells were sterile. Establishing the standard curve with 1 ml of culture fluid containing 352.585 μg of protein. The weight of total protein residue in 1 ml of culture fluid is 1.15 mg, the total protein content accounts for 3.3%. The proportion of E. coli protein in the culture fluid sample of CAR - T cells is 0.06 - 0.21%. The culture fluid of CAR T cell samples at 3, 7 and 14 days did not show E. coli. Conclusion: The results of bacterial culture, quantification of endotoxin and E. coli protein showed that the CAR - T cell product met the quality standard.
TTKHCNQG, CVv 417
Xem toàn văn