BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  21,903,112
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Bệnh học thú y

Nguyễn Thị Hoa, Nguyễn Thị Lan, Trương Quang Lâm(1), Trịnh Đình Thâu(2), Ngô Thị Hạnh

Nghiên cứu phân lập và xác định một số đặc điểm sinh học của virus PED (Porcine Epidemic Diarrhea virus)

Isolation and Identification of Biological C-haracteristics of Porcine Epidemic Diarrhea Virus

Khoa học nông nghiệp Việt Nam

2018

03

257-267

2588-1299

Porcine Epidemic Diarrhea virus, Tiêu chảy, Phân lập, Đặc điểm sinh học

Porcine epidemic diarrhea virus, Virus isolation, Biological c-haracteristics

Virus PED (PEDV) gây tiêu chảy cấp trên lợn và đặc biệt nguy hiểm đối với lợn con theo mẹ. Nghiên cứu phân lập PEDV là tiền đề tốt cho các nghiên cứu về sản xuất vắc xin hay các chế phẩm sinh học trong phòng và trị bệnh. Vì vậy việc lựa chọn được điều kiện thích hợp cho phân lập PEDV và xác định một số đặc điểm sinh học của các chủng PEDV phân lập ở Việt Nam là vô cùng cần thiết. Mẫu ruột non của lợn được chẩn đoán dương tính với PED dựa trên kỹ thuật RT-PCR và dòng tế bào Vero được sử dụng cho nghiên cứu này. Các chủng PEDV phân lập được xác định hiệu giá virus và dựng đường cong sinh trưởng. Kết quả đã phân lập thành công 13 PEDV từ 83 mẫu bệnh phẩm. Môi trường phân lập có bổ sung 10 μg/ml trypsin là thích hợp cho phân lập virus. PEDV thích ứng và gây bệnh tích tế bào bắt đầu ở đời cấy chuyển thứ 2. Bệnh tích tế bào biểu hiện rõ với các đám tế bào bị dung giải màng, nhân tế bào co cụm lại với nhau hình thành các thể hợp bào. Bệnh tích tế bào xuất hiện ở 12 giờ sau gây nhiễm và tế bào bị phá hủy hoàn toàn sau 36 - 48 giờ gây nhiễm. Hiệu giá virus ở đời đầu tiên khi xuất hiện bệnh tích tế bào đạt từ 103,4 TCID50/ml đến 105,7 TCID50/ml. Sau 4 đời cấy chuyển liên tiếp hiệu giá virus có xu hướng tăng đạt từ 105,3 TCID50/ml đến 107,3 TCID50/ml.

Porcine Epidemic Diarrhea Virus (PEDV) causes acute diarrhea in pigs and this is especially dangerous for piglets. Isolation of PEDV is a pre-requisite for research on production of vaccines or bioformulations in the prevention and treatment of the disease. Small intestines of pigs diagnosed positively with PEDV based on RT-PCR method and vero cell lines were used for this study. PEDV isolations were determined for the viral titre and the growth curve. A total of 13 PEDV strains were successfully isolated f-rom 83 disease samples. The medium containing 10μg/ml trypsin was suitable for viral isolation. PEDV was permissive for replication and caused disease at the beginning of the second culture passage. Infected vero cell cultures exhibited c-haracteristics CPE by cell-fusion and syncytial formation. CPE occured at 12 hours post infection and the cells were completely destroyed after 36 to 48 hours of infection. In the first passage, CPE viral titre ranged f-rom 103,4 to 105,7 TCID50/ml but after 4 culture passages, the viral titre increased f-rom 105,3 to 107,3 TCID50/ml.

TTKHCNQG, CTv 169

Xem toàn văn
  • [1] Wood, E. (1977), An apparently new syndrome of porcine epidemic diarrhoea,The Veterinary record, 100: 243.
  • [2] Wang, L., Byrum, B., Zhang, Y. (2014), Detection and Genetic C-haracterization of Deltacoronavirus in Pigs, Ohio, USA,Emerging Infectious Diseases, 20: 1227-1230
  • [3] Tyrrell, D., Alexander, D., Almeida, J., Cunningham, C., Easterday, B., Garwes, D., Hierholzer, J., Kapikian, A., Macnaughton, M., McIntosh, K. (1978), Coronaviridae: second report,Intervirology, 10: 321-328.
  • [4] Duy, D.T., Toan, N.T., Puranaveja, S., Thanawongnuwech, R. (2011), Genetic c-haracterization of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) isolates f-rom southern Vietnam during 2009-2010 outbreaks,The Thai Journal of Veterinary Medicine, 41: 55
  • [5] Takahashi K, Okada K, Ohshima K. (1983), An outbreak of swine diarrhea of a new-type associated with coronavirus-like particles in Japan,Jpn J Vet Sci.,45: 829-32.
  • [6] Sun, P., Gu, C., Ding, Y., Wei, J., Yin, Z., Geng, Z., Li, Y. (2015), Sequence and phylogenetic analyses of the M and N genes of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) strains in Anhui Province, China,Genetics and Molecular Research, 14: 13403- 13413
  • [7] Stevenson, G.W., Hoang, H., Schwartz, K.J., Burrough, E.R., Sun, D., Madson, D., Cooper, V.L., Pillatzki, A., Gauger, P., Schmitt, B.J. (2013), Emergence of Porcine epidemic diarrhea virus in the United States: clinical signs, lesions, and viral genomic sequences,Journal of Veterinary Diagnostic Investigation, 25: 649-654
  • [8] Song, D.S., Kang, B.K., Oh, J.S., Ha, G.W., Yang, J.S., Moon, H.J., Jang, Y.-S., Park, B.K. (2006), Multiplex reverse transcription-PCR for rapid differential detection of porcine epidemic diarrhea virus, transmissible gastroenteritis virus, and porcine group A rotavirus,Journal of veterinary diagnostic investigation, 18: 278-281.
  • [9] Puranaveja, S., Poolperm, P., Lertwatc-harasarakul, P., Kesdaengsakonwut, S., Boonsoongnern, A., Urairong, K., Kitikoon, P., Choojai, P., Kedkovid, R., Teankum, K. (2009), Chinese-like strain of porcine epidemic diarrhea virus,Thailand. Emerging infectious diseases, 15: 1112.
  • [10] Pensaert, M., De Bouck, P. (1978), A new coronaviruslike particle associated with diarrhea in swine,Archives of virology, 58: 243-247
  • [11] Pan, Y., Tian, X., Li, W., Zhou, Q., Wang, D., Bi, Y., Chen, F., Song, Y. (2012), Isolation and c-haracterization of a variant porcine epidemic diarrhea virus in China,Virology journal, 9: 195.
  • [12] Nguyễn Văn Điệp, Nguyễn Thị Lan, Nguyễn Thị Hoa, Yamaguchi (2014), Một số đặc điểm dịch tễ và bệnh lý của bệnh tiêu chảy thành dịch trên lợn ở một số tỉnh phía bắc Việt Nam,Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, 21(2): 43-56.
  • [13] Li, W., Li, H., Liu, Y., Pan, Y., Deng, F., Song, Y., Tang, X., He, Q. (2012), New variants of porcine epidemic diarrhea virus, China (2011),Emerging infectious diseases, 18: 1350.
  • [14] Lee, S., Kim, Y., Lee, C. (2015), Isolation and c-haracterization of a Korean porcine epidemic diarrhea virus strain KNU-141112,Virus research, 208: 215-224.
  • [15] Lan, D., Gu, J., Xing, R., Yuan, C., Cui, L., Hua, X., Yang, Z. (2011), Sequence analysis of the ORF7 region of chinese transmissible gastroenteritis virus isolate TGEs-1,Bull Vet Inst Pulawy, 55: 169-175.
  • [16] Kweon, C., Kwon, B., Jung, T.S., Kee, Y., Hur, D., Hwang, E., Rhee, J., An, S. (1993), Isolation of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) in Korea,Korean J Vet Res., 33: 249-254
  • [17] Kusanagi, K.-i., Kuwahara, H., Katoh, T., Nunoya, T., Ishikawa, Y., Samejima, T., Tajima, M. (1992), Isolation and serial propagation of porcine epidemic diarrhea virus in cell cultures and partial c-haracterization of the isolate,Journal of Veterinary Medical Science, 54: 313-318
  • [18] Kim, S.Y., Song, D.S., Park, B.K. (2001), Differential detection of transmissible gastroenteritis virus and porcine epidemic diarrhea virus by duplex RTPCR,Journal of veterinary diagnostic investigation, 13: 516-520
  • [19] Jung, K., Saif, L.J. (2015), Porcine epidemic diarrhea virus infection: Etiology, epidemiology, pathogenesis and immunoprophylaxis,The Veterinary Journal, 204: 134-143.
  • [20] Hofmann, M., Wyler, R. (1989), Quantitation, biological and physicochemical properties of cell culture-adapted porcine epidemic diarrhea coronavirus (PEDV),Veterinary microbiology, 20: 131-142.
  • [21] Hofmann, M., Wyler, R. (1988), Propagation of the virus of porcine epidemic diarrhea in cell culture,Journal of clinical microbiology, 26: 2235-2239
  • [22] Debouck, P., Pensaert, M., Coussement, W. (1981), The pathogenesis of an enteric infection in pigs, experimentally induced by the coronavirus-like agent,CV 777. Veterinary Microbiology, 6: 157-165.
  • [23] Chung, H.-C., Van Giap Nguyen, H.-J.M., Lee, J.-H., Park, S.-J., Lee, G.-E., Kim, H.-K., Noh, Y.-S., Lee, C.-H., Goede, D., Park, B.K. (2015), Isolation of porcine epidemic diarrhea virus during outbreaks in South Korea, 2013-2014,Emerging infectious diseases, 21: 2238.
  • [24] Chen, Q., Li, G., Stasko, J., Thomas, J.T., Stensland, W.R., Pillatzki, A.E., Gauger, P.C., Schwartz, K.J., Madson, D., Yoon, K.-J. (2014), Isolation and c-haracterization of porcine epidemic diarrhea viruses associated with the 2013 disease outbreak among swine in the United States,Journal of clinical microbiology, 52: 234-243.
  • [25] Chasey, D., Cartwright, S. (1978), Virus-like particles associated with porcine epidemic diarrhoea,Research in veterinary science, 25: 255-256