Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu xây dựng và thẩm định phương pháp xác định hàm lượng một số kháng sinh nhóm tetracycline bao gồm: Tetracycline (TC), Oxytetracycline (OTC), Chlortetracycline (CTC), Metacycline (MC), Doxycycline (DC) và các đồng phân: 4-epi Oxytetracycline (4-epi OTC), 4-epi Tetracycline (4-epi TC), 4-epi Chlortetracycline (4-epi CTC) trong thịt và sản phẩm từ thịt bằng sắc ký lỏng khối phổ hai lần (LC-MS/MS). Quy trình xử lý mẫu được thực hiện nhanh và đơn giản: mẫu được chiết với đệm McIlvaine-EDTA, kết tủa protein bằng acid tricloacetic. Sau đó, dịch chiết được làm sạch trên cột chiết pha rắn HLB. Quá trình phân tách được thực hiện trên cột sắc ký pha đảo X-bridge C18 (150 mm x 2,1 mm id; 3,5 μm), pha động kênh A là acid formic 0,1%/H2O, kênh B là ACN; tốc độ dòng 0,5 mL/phút, thể tích tiêm 10 µL. Phương pháp được thẩm định có độ đặc hiệu tốt, đường chuẩn của các chất phân tích tuyến tính trong khoảng nồng độ 15 – 150 µg/kg. Giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ) đạt được với các chất phân tích tương ứng là 5 µg/kg và 15 µg/kg. Độ đúng được đánh giá qua độ thu hồi đạt được trong khoảng 84,23 – 108,5%, độ chụm được đánh giá qua độ lặp lại và độ tái lập nội bộ đạt yêu cầu theo AOAC. Phương pháp đã được áp dụng để phân tích dư lượng kháng sinh nhóm tetracycline và đồng phân trong 10 mẫu thực phẩm (thịt gà, thịt lợn, giò sống, xúc xích) thu thập trên thị trường.

The study was conducted with the aim of developing and validating a method for determining the content of some tetracycline group substances including tetracycline (TC), oxytetracycline (OTC), chlortetracycline (CTC), metacycline (MC), doxycycline (DC) and epimers: 4-epi oxytetracycline (4-epi OTC), 4-epi tetracycline (4-epi TC), 4-epi chlortetracycline (4-epi CTC) in meat and meat products by liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). The sample processing procedure was quick and simple: the sample was extracted with McIlvaine-EDTA buffer, and the protein was precipitated with trichloroacetic acid. Then, the extract was cleaned on a HLB solid-phase extraction column. The separation was performed on a reversed-phase X-bridge C18 column (150 mm x 2.1 mm id; 3.5 μm), mobile phase channel A was 0.1% formic acid in H2O, channel B was ACN; flow rate 0.5 mL/min, injection volume 10 μL. The validated method showed good specificity, the standard curve of the analytes was linear in the concentration range of 15 – 150 μg/kg. The limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ) were achieved with the corresponding analytes of 5 μg/kg and 15 μg/kg. The accuracy was assessed by recovery in the range of 84.23 – 108.5%, the precision was assessed by repeatability and internal reproducibility met the requirements according to AOAC. The method was applied to analyze the content of tetracycline antibiotics and epimers in 10 food samples (chicken, pork, ham, sausage) collected f-rom the market.