BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  20,473,558
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Hoá dược học

Nguyễn Văn Khanh, Nguyễn Thị Thanh Bình, Đặng Kim Thu, Đặng Thảo Linh, Vũ Thị Ngọc Anh, Vũ Thị Thu Giang(1), Seijiro Honma

Định lượng đồng thời cortisol và testosterone trong huyết thanh chuột bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao ghép nối đầu dò khối phổ

Simultaneous Determination of Cortisol and Testosterone from Rat Serum by Liquid Chromatoggraphy-Tandem Mass Spectrometry

Tạp chí Khoa học Y dược – Đại học Quốc gia Hà Nội

2022

01

45-53

2615-9309

Sắc ký lỏng hiệu năng cao, Cortisol, Testosterone, Huyết thanh chuột, Chiết xuất pha rắn

LC-ESI-MS/MS, cortisol, testosterone, rat serum, solid-phase extraction.

Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ghép nối đầu dò khối phổ với chế độ ion hóa phun điện tử dương (LC-ESI-MS/MS) được phát triển để định lượng đồng thời cortisol và testosterone trong huyết thanh chuột. Chế độ MRM (Multiple Reaction Monitoring) được sử dụng để tối ưu: m/z ion mẹ, thế phân mảnh, m/z ion con và năng lượng bắn phá tạo ion. Các mẫu phân tích được xử lý bằng phương pháp chiết xuất pha rắn với cột Bond Elut C18. Phương pháp phân tích được thẩm định theo hướng dẫn phân tích thuốc trong dịch sinh học của FDA. Kết quả cho thấy phương pháp phân tích có khoảng định lượng rộng (0,1– 100 ng/mL đối với cortisol và 0,025 – 100 ng/mL đối với testosterone), tính tuyến tính tốt (r2 > 0,999), giới hạn định lượng thấp (LLOQ của cortisol và testosterone lần lượt là 0,1 ng/mL và 0,025 ng/mL), độ thu hồi cao (90,4% - 108,0%), đảm bảo độ lặp lại (với CV từ 2,7% - 14,8%), mẫu ổn định trong các điều kiện khác nhau. Phương pháp phân tích đã được ứng dụng để định lượng nồng độ cortisol và testosterone trong một số mẫu máu chuột thí nghiệm.

A liquid chromatography-electrospray ionization tandem mass spectrometry in a positive mode (LC-ESI-MS/MS) was developed to determine simultaneously the levels of cortisol and testosterone in rat serum. The MRM (Multiple Reaction Monitoring) was used to optimize ion precursor, fragmentor voltage, ion product, and collision energy. Analytical samples were treated by solid-phase extraction with Bond Elut C18 cartridge. The method was validated according to FDA guidance for bioanalytical method validation. The results indicated that this method showed a wide linearity range (0.1-100 ng/mL for cortisol and 0.025-100 ng/mL for testosterone), good linearity (r2 > 0.999), low limit of quantification (LLOQ values of cortisol and testosterone were 0.1 ng/mL and 0.025 ng/mL, respectively), good recovery (90.4% - 108.0%), suitable repeatability (CV values were in the range of 2.7% - 14.8%), good stability in different conditions. The validated method was applied to quantify cortisol and testosterone levels in several rat blood samples.

TTKHCNQG, CTv 182

Xem toàn văn