Lúa Bắc Thơm 7 (lúa BT7) là một trong những giống lúa ưu tú của Việt Nam, có năng suất, chất lượng vượt trội nhưng rất dễ nhiễm bệnh cháy bìa lá do vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv gây ra. oryzae. Gen OsSWEET14, thuộc họ OsSWEET mã hóa các protein vận chuyển đường, được coi là một gen nhạy cảm liên quan đến độc lực của Xoo. Ít nhất ba yếu tố cis (EBE - Yếu tố liên kết nỗ lực), bao gồm Tal5, PthXo3 và AvrXa7 trên promoter BT7 OsSWEET14, liên kết đặc biệt với các hiệu ứng giống như chất hoạt hóa phiên mã nổi tiếng (TALEs) của nhiều chủng vi khuẩn Xoo châu Á. Trong nghiên cứu này, cấu trúc T-DNA biểu hiện phức hợp protein-RNA CRISPR / Cas để chỉnh sửa vị trí ba EBE trên promoter OsSWEET14 đã được thiết kế. Vectơ nhị phân tái tổ hợp được kiểm tra bằng PCR, enzym giới hạn và cuối cùng là giải trình tự sau đó chuyển thành công vào lúa Bắc Thơm 7 thông qua vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens. 28 trong số 30 dòng lúa tái sinh kháng hygromycin sinh trưởng và phát triển bình thường trong điều kiện cây trồng mới được PCR chọn lọc với các loại mồi cụ thể. Trong số này, có 12 dòng lúa chuyển gen được xác định mang một bản sao cấu trúc T-DNA. Sự hiện diện của đột biến do CRISPR / Cas9 gây ra của promoter mục tiêu trong cây chuyển gen đã được xác nhận bằng xét nghiệm T7EI. Kết quả này cung cấp cơ sở để xác định vai trò của OsSWEET14 đối với tính mẫn cảm của lúa Bắc Thơm 7 đối với Xanthomonas oryzae pv. bệnh do oryzae gây ra, hướng tới mục tiêu xa hơn là tạo ra giống lúa Bắc Thơm 7 cải tiến kháng bệnh bạc lá do vi khuẩn phổ rộng sử dụng công nghệ CRISPR / Cas9.
Lọc theo danh mục
Lượt truy cập :
19,993,461
Xem toàn văn