BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  22,377,422
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

76

Dược liệu học; Cây thuốc; Con thuốc; Thuốc Nam, thuốc dân tộc

Vũ Xuân Tạo(2), Nguyễn Thị Hà Ly(4), Trần Bảo Trâm(3), Nguyễn Đức Duy, Nguyễn Thảo Nhi, Nguyễn Thị Thanh Mai(1), Đào Ngọc Ánh, Trần Văn Tuấn

Phát triển phương pháp HPLC-DAD định lượng pentostatin trong quả thể nấm dược liệu Cordyceps militaris

Development of HPLC-DAD method for the quantification of pentostatin in the fruiting body of Cordyceps militaris

Khoa học & công nghệ Việt Nam

2023

07B

60 - 66

1859-4794

Quả thể nấm, Dược liệu Cordyceps militaris, Phương pháp HPLC-DAD, Định lượng pentostatin

Cordyceps militaris, Fruiting body, HPLC-DAD, Pentostatin.

Cordyceps militaris là loài nấm dược liệu quan trọng trong y học cổ truyền. Chúng chứa nhiều hoạt chất có hoạt tính sinh học ứng dụng trong y học như cordycepin, adenosine… Gần đây thông qua phân tích hệ gen, C. militaris đã được chứng minh có khả năng sinh tổng hợp pentostatin. Pentostatin là hoạt chất quan trọng trong sản xuất các loại thuốc hóa trị sử dụng trong điều trị ung thư. Tuy nhiên, việc phát triển các phương pháp định lượng pentostatin trong nấm C. militaris chưa có nhiều nghiên cứu đề cập. Trong nghiên cứu này, các tác giả xây dựng và thẩm định phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC-DAD) đơn giản với độ chính xác cao để định lượng pentostatin trong quả thể nấm C. militaris. Quá trình sắc ký được thực hiện trên cột C18 của Hãng Agilent (250x4,6 mm, 5 µm) với chương trình rửa giải gradient sử dụng hệ dung môi pha động gồm acetonitrile và nước. Tốc độ rửa giải là 0,6 ml/phút, bước sóng phát hiện được lựa chọn là 280 nm. Đường chuẩn xây dựng được đều đạt độ tuyến tính cao với R2 >0,99. Kết quả thẩm định phương pháp về độ lặp lại, hiệu suất thu hồi, độ chọn lọc đều đạt theo hướng dẫn của Hội nghị quốc tế về hài hòa các thủ tục đăng ký dược phẩm sử dụng cho con người (International Conference on Harmonization).

Cordyceps militaris is an important medicinal mushroom in traditional medicine. It contains many bioactive compounds that have applications in medicine, such as cordycepin, adenosine... Recently, through genome analysis, C. militaris has been shown to have the ability to synthesise pentostatin. Pentostatin is an important active ingredient in the production of chemotherapy drugs used in cancer treatment. However, there have been few studies on the development of methods for quantifying pentostatin in C. militaris. In this study, a simple and sensitive high-performance liquid chromatography with diode-array detection (HPLC-DAD) method for the quantification of pentostatin in C. militaris was developed and validated. The chromatographic separations were obtained by an Agilent C18 column (250x4.6 mm i.d., 5 µm particle size) using gradient elution with acetonitrile and water. The flow rate of 0.6 ml/min and detection wavelength of 280 nm were se-lected. The calibration curve displayed a good linear correlation (R2 >0.99). The validation results displayed great accuracy, repeatability, linearity, and se-lectivity according to The International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use (ICH) guideline.

TTKHCNQG, CVv 8

Xem toàn văn
  • [1] Nguyễn Văn Hân (2017), Kỹ thuật chiết xuất dược liệu.,
  • [2] (2007), How to Meet ISO 17025 Requirements for Method Verification.,https://www.aoac.org/wp-content/uploads/2019/09/ALACC-method-verification.pdf
  • [3] Trần Cao Sơn; Phạm Xuân Đà; Lê Thị Hồng Hảo; Nguyễn Thành Trung (2010), Thẩm định phương pháp trong phân tích hóa học và vi sinh vật.,
  • [4] X. Zhao; G. Zhang; C. Li; J. Ling (2019), Cordycepin and pentostatin biosynthesis gene identified through transcriptome and proteomics analysis of Cordyceps kyushuensis Kob.,Microbiological Research, 218, pp.12-21.
  • [5] (2005), Validation of Analytical Procedures: Text and Methodology.,International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use.
  • [6] C.H. Yoo; M.A. Sadat; W. Kim (2022), Comprehensive transcriptomic analysis of Cordyceps militaris cultivated on germinated soybeans.,Mycobiology, 50(1), pp.1-11.
  • [7] Vũ Xuân Tạo; Trần Bảo Trâm; Nguyễn Thị Mến (2022), Nghiên cứu xác định gen giới tính MAT, năng suất và hàm lượng cordycepin của một số chủng nấm dược liệu Cordyceps militaris đang được nuôi trồng tại Việt Nam.,Tạp chí Khoa học và Công nghệ Việt Nam, 64(7), tr.60-64.
  • [8] Phan Lê Hiền; Hà Minh Hiển (2019), Nghiên cứu xây dựng quy trình định lượng cordycepin trong đông trùng hạ thảo Cordyceps militaris bằng phương pháp HPLC.,Tạp chí Dược học, 59(3), tr.20-23.
  • [9] A. Sarvaria; Z. Topp; A. Saven (2016), Current therapy and new directions in the treatment of hairy cell leukemia a review.,JAMA Oncology, 2(1), pp.123-129.
  • [10] Y. Xia; F. Luo; Y. Shang (2017), Fungal cordycepin biosynthesis is coupled with the production of the safeguard molecule pentostatin.,Cell Chemical Biology, 24(12), pp.1479-1489.
  • [11] J.Y. Wu; H.P. Leung; W.Q. Wang; C. Xu (2014), Mycelial fermentation c-haracteristics and anti-fatigue activities of a Chinese caterpillar fungus, Ophiocordyceps sinensis strain Cs-HK1 (Ascomycetes).,International Journal of Medicinal Mushrooms, 16(2), pp.105-114.
  • [12] U.B. Shrestha; K.S. Bawa (2014), Economic contribution of Chinese caterpillar fungus to the livelihoods of mountain communities in Nepal.,Biological conservation, 177, pp.194-202.
  • [13] Nguyễn Thị Liên Thương; Nguyễn Văn Hiệp; Trịnh Diệp Phương Danh (2016), Nấm đông trùng hạ thảo Cordyceps militaris: Đặc điểm sinh học, giá trị dược liệu và các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình nuôi trồng nấm.,Tạp chí Khoa học, Trường Đại học Cần Thơ, 44, tr.9-22.
  • [14] L. Huang; Q. Li; Y. Chen (2009), Determination and analysis of cordycepin and adenosine in the products of Cordyceps spp.,African Journal of Microbiology Research, 3(12), pp.957-961.
  • [15] (2015), Pharmacopoeia of The People’s Republic of China.,
  • [16] S.K. Das; M. Masuda; A. Sakurai; M. Sakakibara (2010), Medicinal uses of the mushroom Cordyceps militaris: Current state and prospects.,Fitoterapia, 81(8), pp.961-968.