BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  22,411,148
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

62.37

Công nghệ sinh học công nghiệp

Nghiêm Ngọc Minh, Nguyễn Thị Hoài Thu, Bùi Văn Ngọc(1), Phạm Thùy Linh, Trần Minh Trí

Tạo đột biến điểm định hướng trên gen Staphylococcal enterotoxin B (SEB) tự nhiên và thiết kế vector biểu hiện gen SEB đột biến mất độc tính

Generation of site-directed mutagenesis of wild type Staphylococcal enterotoxin B (SEB) gene and design of expression vector carrying mutant non-toxic SEB gene

Công nghệ Sinh học

2014

3

423-429

1811-4989

Đột biến điểm định hướng, Kháng thể đơn dòng, Plasmid tái tổ hợp, Staphylococcal enterotoxin B

Staphylococcal enterotoxin B (SEB) excreted by Staphylococcus aureus is a common cause of food poisoning. Moreover, SEB is one of the harmful or hazard agents used as biological weapons in bioterrorism or biological warfare. Thus, the creation of nontoxic mutant SEB with immunological reactivity for production of monoclonal antibodies and for further development of detection kit of SEB is of great interest. In the present study, the mutant SEB in the form of nontoxicity was produced by replacing four histidinesof the wild type SEB with tyrosines at positions 12, 32, 105, and 121 by Mega-primer method, respectively. The mutant was cloned and ligated into pET22b+ expression vector to establish pET22b+/mtSEB recombinant plasmid. The cell clones carrying recombinant DNA was selected by colony - PCR and digestion with EcoRl and HindIII restriction enzymes. The results of this study showed that mutant seb gene containing four site mutations (SEB H12Y/H32Y/H105Y/H121Y) was created by wild-type SEB gene (length of 534 nucleotides) in S. aureus isolated from Vietnam and successful designing pET22b+/mtSEB recombinant vector. The mutant SEB obtained will be used as biological materials for later studies in order to develop quick detection kit of SEB, such as rapid lateral flow strip kits or biosensors.

TTKHCNQG, CVv 262

Xem toàn văn