Gen mã hóa cho endoglucanase GH5 được khai thác từ dữ liệu DNA metagenome vi khuẩn dạ cỏ dê Việt Nam có cấu trúc module, gồm vùng xúc tác cellulase, module Fn3 và module X. Enzyme tái tổ hợp đã được biểu hiện thành công trong E. coli và đã được tinh chế. Để nghiên cứu ảnh hưởng của một số ion kim loại và hóa chất đến hoạt tính của enzyme, kết quả dựa trên dựa đoán nhanh cấu trúc phân tử của trình tự endoglucanase GH5 bằng Swiss-Prot, ProFunc và COFACTOR cho thấy enzyme có hai gốc amino acid bảo thủ (Asp-190 và Asp-192) liên kết với Mn2+ trong khoảng bán kính 3,5 Å từ tâm của ion Mn2+ và có chứa một cầu disulphide trong phân tử. Kết quả nghiên cứu thực nghiệm ảnh hưởng của một số ion kim loại (Ca2+, Mn2+, Mg2+, Ni2+, K+, Co2+, Cu2+, Zn2+, Fe3+) ở nồng độ cuối cùng là 10 mM và sáu loại hóa chất thường sử dụng là SDS (1%), urea (1 μM), 2-mercaptoethanol (1 μM), EDTA (1 μM), tween 80 (1mM), triton X-100 (1 μM) lên hoạt tính endoglucanase GH5 cho thấy hoạt tính của enzyme được xác định tăng nhẹ khi sử dụng 10 mM Mn2+ và tăng lên 2 lần khi sử dụng 40 mM Mn2+ nhưng đều bị giảm khi bổ sung các ion kim loại và hóa chất khác. Mn2+ được xác định có thể liên kết đặc thù, làm tăng tính ổn định và hoạt tính của endoglucanase GH5.
Lọc theo danh mục
Lượt truy cập :
22,408,250
Xem toàn văn