BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  20,504,567
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Các công nghệ tế bào trong nông nghiệp

Nguyễn Tiến Cường, Nguyễn Thị Hiền Trang, Nguyễn Thị Thảo, Lê Thanh Hoàng, Nguyễn Sỹ Lê Thanh, Nguyễn Thị Ánh Tuyết, Nguyễn Mạnh Đạt(1), Lê Đức Mạnh, Đỗ Thị Thanh Huyền, Nguyễn Thị Thu, Nguyễn Thị Trung, Hoàng Thị Yến, Đỗ Thị Tuyên

Nhân dòng và biểu hiện enzyme Maltooligosyltrehalose trehalohydrolase từ chủng vi khuẩn cổ sulfolobus solfataricus DSM 1616 trong Bacillus subtilis WB800

Tạp chí Công nghệ Sinh học - Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam

2020

2

363-372

1811-4989

Enzyme, Protein, Năng suất, Trao đổi chất, Maltooligosyltrehalose trehalohydrolase, Bacillus subtilis

Maltooligosyltrehalose trehalohydrolase (MTHase) là một enzyme công nghiệp dùng cho việc sản xuất đường trehalose. Nghiên cứu biểu hiện enzyme MTHase trong B. subtilis WB800 là một hệ biểu hiện protein ngoại bào có năng suất biểu hiện cao và ổn định. Hiện nay một số chủng B. subtilis như B. subtilis WB600, WB700, WB800 đã loại bỏ tương ứng 6, 7 và 8 protease ngoại bào, do đó hạn chế việc phân cắt protein ngoại lai, dẫn tới làm tăng năng suất protein biểu hiện. Vì vậy, MTHase sẽ được nghiên cứu biểu hiện trong B. subtilis WB800 để nâng cao năng suất biểu hiện sinh tổng hợp enzyme. Gene mã hóa cho MTHase được chèn vào genome của B. subtilis WB800 bằng sự kiện trao đổi chéo với đoạn tương đồng trên vector biểu hiện pAC7. Đoạn DNA mã hóa cho MTHase được nhân lên từ S. solfataricus DSM 1616, đồng thời đoạn signal biểu hiện acoA-amyE được nhân từ vectơ pMSE3. Hai sản phẩm từ hai quá trình nhân dòng riêng biệt được nối lại với nhau bằng phản ứng PCR dung hợp để tạo cassette acoMTH. Thông qua sự kiện trao đổi chéo ở hai đầu 3’amyE- 5’amyE, cassette biểu hiện được chèn vào genome của B. subtilis WB800. Từ những số liệu thu được cho thấy cassette biểu hiện được chèn thành công vào genome B. subtilis WB800 và thay thế đoạn 3’amyE-5’amyE, làm mất khả năng sản xuất amylase của vật chủ. MTHase được biểu hiện sau khi được cảm ứng 0,5% acetoin sau 48 giờ, có kích thước khoảng 64 kDa, mức độ protein biểu hiện ở các dòng tăng tương ứng đạt 2,5%, 15,2% và 21,95% sau khi được đánh giá bằng phần mềm dolphin 1D so với chủng gốc B. subtilis WB800.

TTKHCNQG, CVv 262

Xem toàn văn