BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  21,778,283
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Công nghệ sinh học

Võ Thị Thương Lan(1), Lê Thị Thanh

Xây dựng thang chuẩn DNA để xác định các băng DNA kích thước nhỏ

Tạp chí Công nghệ Sinh học - Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam

2021

3

539-545

1811-4989

Enzyme giới hạn, DNA lặp, Plasmid tái tổ hợp, Thang chuẩn DNA, Thang chuẩn SY-60 bp

Thang chuẩn DNA được sử dụng thường quy trong các phòng thí nghiệm, xét nghiệm về sinh học phân tử. Bên cạnh nguồn thang chuẩn do các hãng thương mại cung cấp, các thang chuẩn được nhiều phòng thí nghiệm chủ động tạo ra (home-made DNA ladders). Trong bài báo này, chúng tôi đưa ra quy trình sản xuất thang chuẩn SY-60 gồm 7 băng, băng nhỏ nhất có kích thước 60 bp, hỗ trợ cho các thang chuẩn thương mại 50 bp. Đoạn DNA 60 bp có vị trí nhận biết của EcoRI ở hai đầu 5’ và 3’ được tổng hợp nhân tạo bằng PCR, tự nối với nhau nhờ T4 DNA ligase và được tách dòng tạo plasmid pSY-60. Cắt không hoàn toàn pSY-60 với enzyme giới hạn EcoRI tạo nên thang chuẩn SY-60 gồm 7 băng, băng nhỏ nhất 60 bp, bước nhảy giữa 2 băng là 60 bp. Quy trình sản xuất thang chuẩn SY-60 đơn giản, chi phí thấp, thích hợp cho việc xác định kích thước nhỏ của các đoạn DNA, cDNA khuếch đại bởi phản ứng PCR.

TTKHCNQG, CVv 262

Xem toàn văn