Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  22,429,324
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Công nghệ gen; nhân dòng vật nuôi;

Vũ Hoài Sâm(1), Phạm Thị Vân, Cao Lệ Quyên(3), Phạm Xuân Hội(2), Nguyễn Duy Phương

Ảnh hưởng của một số yếu tố đến hiệu quả chuyển gen vào phôi hạt non giống lúa bắc thơm số 7 nhờ Agrobacterium tumefaciens

Factors affecting Agrobacterium - mediated transformation efficiency of Bac thorn 7 rice cultivars using immature embryos by Agrobacterium tumefaciens

Khoa học và Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam

2020

07

99 - 104

1859 - 1558

Giống lúa Bắc thơm số 7 là một trong nhửng giống lúa được trồng phổ biến ở các tỉnh phía Bắc của Việt Nam, được người tiêu dùng ưa chuộng. Quy trình chuyển gen vào BT7 cần được thiết lập để có thể ứng dụng được công nghệ chỉnh sửa hệ gen nhằm cải thiện và nâng cao chất lượng giống lúa này. Callus từ phôi hạt non có khả năng tái sinh chồi tốt hơn so với phôi già. Nghiên cứu này đã xác định được các yếu tố tuổi phôi, mật độ khuẩn, nồng độ acetosyrmgone và thời gian đồng nuôi cấy có ảnh hưởng đến hiệu quả quá trình chuyển gen vào phôi hạt non giống BT7. Kết quả cho thấy tuổi phôi từ 11 -13 DAP đồng nuôi cấy với dung dịch vi khuẩn A. tumefaciens có OD600nm = 0,3 trên môi trường có bổ sung 150 µM acetosyringone trong thời gian 5 ngày cho hiệu suất chuyển gen đạt 20,6%.

Bac thorn 7 is one of the main rice varieties and favored in Vietnam. A rice-transformation protocol should be established in order to to apply the genome editing technology for improving the quality of BT7 rice cultivar. Callus from the immature embryos had better regeneration ability than the mature ones for the indica rice. In this study, some factors such as explant age, Agrobacterium density, acetosyringone concentration and length of co-cultivation days affecting efficiency of the genetic transformation for BT7 rice cultivar were determined. The results showed that the embryo age ofi1-13 DAP co-cultured with a solution of A. tumefaciens with OD600nm = 0.3 on the medium supplemented with 150 µM acetosyringone for 5 days reached 20.56% ot the transgenic efficiency.

TTKHCNQG, CVv 490

  • [1] Visarada; KB.; Sailaja; M.; Sarma; NP. (2002), Effect of callus induction media on morphology of embryogenic calli in rice genotypes.,Biology Plant, 45:495-502.
  • [2] Toriyama; K.; Hinata; K. (1985), Cell suspension and protoplast culture in rice.,Plant Sci., 41:179-183.
  • [3] Slamet; IH.; Chadha; PM.; Torrizo L.; F. Robert JH; Agnelo. (2014), Agrobacterium-Mediated transformation: Rice transformation. Cereal Genomics: Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology.,New York : Springer Science+Business Media. Vol: 1099.
  • [4] Sawant; GB.; Sawardekar; SV.; Bhave; SG.; Kshirsagar; JK. (2018), Effect of acetosyringone and age of callus on Agrobacterium-mediated transformation of rice (Oryza sativa L.) calli.,International Journal of Chemical studies, 6(3): 82-88.
  • [5] Sambrook; J.; Russel; DW. (2001), A laboratory Manual, 3rd ed.,New York : Cold Spring Harbour Laboratory Press, Cold spring Harbour.
  • [6] Sahoo; KK.; Tripathi; AK.; Pareek; A.; Sopory; SK.; Pareek; SS. (2011), An improved protocol for efficient transformation and regeneration of diverse indica rice cultivars.,Plant Methods, 7 (49): 11.
  • [7] Korotkova; AM.; Gerasimova; SV.; Khlestkina; EK. (2019), Current achivements in modifying crop genes using CRISPR/Cas system.,Vavilov J. Genet. iBreed., 631 (527): 224-234.
  • [8] Itoh; JI.; Nonomura, KL; Ikeda K.; Yamaki; S.; Inukai; Y.; Yamagishi; H.; Kitano; H.; Nagato; Y. (2005), Rice plant devalopment: f-rom Zygote to spikelet.,Plant cell physiol, 46 (l):23-47.
  • [9] Hiei; T.; Komari; Y. (2008), Agrobacterium-mediated transformation of rice using immature embryos or calli induced f-rom mature seed.,J. Nature Protocol, 3 (5): 824-834.
  • [10] Doyle; J.; Doyle; L. (1990), Isolation of plant DNA f-rom fresh tissue.,Focus, 12: 13-15.
  • [11] Aananthi N.; Anandakumar CR. (2018), Genetic transformation in Aromatic Indica rices mediated by Agrobacterium tumerfaciens.,Int.J.Curr. Microbiol. App.Sci, 7 (12): 3458-3487.
  • [12] Cao Lệ Quyên; Trần Tuấn Tú; Phạm Thị Vân; Phạm Xuân Hội (2019), Xây dựng qui trình chuyển gen của giống lúa Bắc thơm số 7 thông qua vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens.,Tạp chí Nông nghiệp và Phát triển nông thôn, 5: 25-30.