BỘ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ
HỆ THỐNG THÔNG TIN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ

Lọc theo danh mục
  • Năm xuất bản
    Xem thêm
  • Lĩnh vực
liên kết website
Lượt truy cập
 Lượt truy cập :  20,368,473
  • Công bố khoa học và công nghệ Việt Nam

Bảo vệ thực vật

Trần Lan Đài, Phùng Thị Thu Hương, Cao Lệ Quyên(2), Nguyễn Văn Cửu, Nguyễn Thị Thu Hà, Phạm Xuân Hội(1), Nguyễn Duy Phương

Thiết kế cấu trúc chỉnh sửa gen OsSWEET liên quan đến bệnh bạc lá trên lúa TBR225

Design of T-DNA construct for editing SWEET genes involved bacterial leaf blight disease in TBR225 rice variety

Nông nghiệp & Phát triển nông thôn

2022

11

11 - 18

1859-4581

Bạc lá, Lúa TBR225, Cấu trúc, Thiết kế, Chỉnh sửa

Silver leaf, Rice TBR225, Structure, Design, Edit

Bệnh bạc lá lúa do vi khuẩn Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) gây ra những thiệt hại nghiêm trọng cho sản xuất lúa gạo của nhiều quốc gia châu Á và châu Phi. Trong quá trình xâm nhiễm vào cây chủ, Xoo tiết ra protein đặc biệt TAL (Transcription activator like effector); protein này liên kết với các yếu tố cis đặc trưng trên vùng promoter và hoạt hóa biểu hiện của một số gen trong hệ gen cây chủ để phục vụ cho quá trình sinh trưởng và lây nhiễm của vi khuẩn trong cây. Trong nghiên cứu này, đã nghiên cứu TALome của 3 isolate (chủng phân lập) Xoo đại diện của Việt Nam. Isolate VXO_11 mang gen /a/mã hóa protein AvrXa7 và PthXo2B; trong khi VXO_60 và VXO_96 mang gen mã hóa TAL AvrXa7 và PthXo2A. Bốn trình tự crRNA (CRISPR RNA) đặc hiệu cho 2 vị trí DNA liên kết với TAL AvrXa7 và PthXo2A trên promoter OsSWEET13 và OsSWEET14 của giống lúaTBR225 đã được thiết kế bằng các công cụ tin sinh. Các crRNA đã đưọc ghép nối vào vị trí BtgZI và Bsal trên vector trung gian pENTR4; toàn bộ cấu trúc biểu hiện sgRNA đã đưọc chuyển vào vector pCas9 để tạo cấu trúc T-DNA biểu hiện phức hệ CRISPR/Cas9 (Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR associated protein 9) hoàn chỉnh gây đột biến đồng thời hai promoter OsSWEET13 và OsSWEET14 của lúa TBR225. Đây sẽ là tiền đề cho việc tạo giống lúa TBR225 mới kháng bệnh bạc lá phổ rộng bằng công nghệ CRIPSR/Cas9.

Bacterial leaf blight (BLB) disease is caused by Xanthomonas oryzaeyv. oryzae (Xoo), which leads to severe rice yield losses in many Asian and African countries. Xoo secretes special proteins called TALs (Transcription activator like effectors), which bind to specific cis elements located on the promoter region of host genes and activates them to serve its growth and infection in plants. In this study, we studied the TALome of three representative Vietnam Xoo isolates. Isolate VXO_11 carries the tai gene encoding the proteins AvrXa7 and PthXo2B; while VXO_60 and VXO_96 carry genes encoding TAL AvrXa7 and PthXo2A. Four crRNA (CRISPR RNA) were designed using bioinformatics tools for targeting two host DNA sequences recognized by TAL AvrXa7 and PthXo2A on the OsSWEET13anA OsSWEET14 promoters of the TBR225 rice variety. Designed crRNAs were in-serted into BtgTX and Bsa\ sites, respectively, of pENTR4 vector; sgRNA exression construct then ligated into pCas9 vector for generating the T-DNA construct expressing the TBR225 OsSWEET13 and OsSWEET14eảìteả CRISPR/Cas9 (Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR associated protein 9) complex. This will be the premise for the generation of new rice varieties TBR225 with broad-spectrum resistance to BLB using CRIPSR/Cas9 technology.

TTKHCNQG, CVv 201

Xem toàn văn